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浅谈生殖道标本的微生物检验 生殖道标本的检验是临床检验的重要组成部分，近年来由于性传播疾病呈上 升趋势，加之抗生素不合理使用，生殖道疾病逐年增加，如何对标本采集时间不 当，标本不及时送检、标本不合格、采集不规范等因素进行指导和控制是保证检 验结果准确性的重要手段，应当引起临床医生和检验工作者的重视。 1 送检指征 1.1 全身症状 生殖系统感染多不伴发热，但在感染活动期或发生播散性感 染时可发热，但往往发热与乏力同时存在，此外某些感染梅毒等累及神经时虽不 发热，但也会出现全身乏力，急性期或慢性消耗感染者，可能累及胃肠道出现厌 食等。 1.2 皮肤黏膜损害 斑疹、丘疹、 结节、水疱、囊肿、 糜烂、溃疡等的出 现，或由损害发展而来有萎缩、癍痕患者出现疼痛、瘙痒症状。 1.3 男性泌尿生殖系统表现 尿痛、尿频、尿急、尿道分泌物增多，会阴部 疼痛及阴囊疼痛、性功能障碍，甚至泌尿生殖器畸形和缺损。 1.4 女性生殖系统表现 阴道分泌物增多及性状异常、阴道瘙痒及脓性分泌 物流出、下腹疼痛、月经失调、外阴瘙痒、疼痛或性功能障碍。 2 采集标本 女性尿道应排尿 1h 后采集，先拭去尿道口的渗出物，再用拭子通过阴道靠 着耻骨联合按摩尿道采集分泌物，或者清洗尿道，用灭菌纱布或棉球擦拭，用泌 尿生殖拭子插入尿道2～4cm旋转拭子2s，男性尿道用生殖道拭子插入尿道腔2～ 4cm，旋转拭子至少停留20s，使之容易吸收。 阴道分泌物应先擦除过多分泌物和排出液，用无菌棉拭子采取阴道口内侧壁 或后穹隆处分泌物，如果需要涂片再用一个拭子。 宫颈分泌物先用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见。用拭子擦去黏液和分泌物丢 掉，用新的灭菌拭子插入宫颈管2cm 采取分泌物，转动并停留10～20s，让拭子 吸附分泌物置无菌管内送检。 男性前列腺应清洗尿道口，冲洗尿道膀胱，按摩前列腺，用无菌容器收集送 检。 3 注意事项 生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵循无菌操作以减少杂菌污染， 以免造成检验结果不真实性，导致临床诊断出现偏差。 阴道内有大量正常菌群存在，采取宫颈标本应避免触及阴道壁。 沙眼衣原体在宿主细胞内繁殖，取材时拭子应在病变部位停留十几秒，尽可 能采集上皮细胞。 疑有厌氧菌感染，应在床边采样，直接做厌氧培养，避免标本与氧气接触。 4 检验方法和报告方式 4.1 直接检查 将合格标本直接涂于清洁玻片上，用灭菌生理盐水混匀，加 盖玻片镜检，可初步报告清洁度、线索细胞、细胞数量、形态及运动性，若发现 大量的发亮的芽生孢子及假菌丝，提示念珠菌感染，可用暗视野显微镜观察螺旋 体。 4.2 革兰染色镜查 观察形态及染色性，炎症细胞数量及线索细胞，有无念 珠菌、假菌丝及孢子等。 4.3 报告方式 若在白细胞或上皮细胞内见到革兰阴性球菌成对排列可报告 “找到革兰阴性双球菌”；若找到假菌丝和孢子可初步诊断为念珠菌感染。 5 分离、培养 直接接种血平板和中国兰平板，并且同时进行增菌培养。若为革兰阴性杆菌 按氧化酶阳性或阴性及葡萄糖的利用实验鉴定到种。若为革兰阳性菌则按相关操 作程序进行鉴定。 淋病奈瑟菌培养是淋病诊断的重要佐证，目前国外推荐的选择培养基有 TM 和NYC，这些培养基均含有抗生素，可选择抑制许多其他细菌，经过一定条件培 养，根据菌落形态、革兰染色、氧化酶试验、葡萄糖发酵等鉴定，男性患者阳性 率为80%～95%。女性患者阳性率为80%～90%。 superoxol 试验与触酶实验类似，但是用 30%过氧化氢溶液进行，此实验可 区分淋病奈瑟菌和其他奈瑟菌相关菌种。 沙眼衣原体用特异性抗体检测抗原的血清方法。 支原体用衣原体检测试剂盒。 6 药敏实验及注意事项 采用纸片扩散法进行药敏实验，药敏纸片及M-H 琼脂均购自北京天坛药物生 物技术开发公司。 每批培养基制备应检查M-H 琼脂的pH 值，pH 过低、过高都能使某些药物失 去效力，而使另一些药物活性增高。 药敏纸片应冷冻保存，在使用前 1～2h 移出冰箱，平衡至室温后才能打开， 防止热空气接触冷纸片时产生冷疑水，降低含量。 7 讨论［1,2］ 生殖道标本的微生物检验的准确性关键在于标本的采集的真实性、可靠性。 如果标本采集不合格，再好的检验人员也无法得出正确的结论。 由于