聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）微流控芯片DNA分析系统的研制.pdfVIP

第29卷 ，第 12期 2009年 12月 Vo1．29，No．12，pp3379—3382 December，2009 聚 甲基丙烯酸 甲酯 (PMMA)微流控芯片 DNA分析系统的研制 杜晓光 东北大学理学院分析科学研究中心，辽宁 沈阳 110004 摘 要 生物分析是微流控芯片分析最具进一步发展及商品化前景的分支领域之一。报道了基于聚甲基丙 烯酸 甲酯 (PMMA)微流控芯片DNA分析系统的研制。采用简易热压法 自制的PMMA芯片，以小型光纤式 激光诱导荧光为检测器，以四触点可切换 l800V高压电源为电驱动系统，以2 羟乙基纤维素 (HEC)为筛 分介质，通过用于DNA分析的TO-PR3荧光染料和激光诱导荧光检测器 670nlTl截止滤光片的选择，构 建了微流控芯片DNA分析系统。芯片凝胶 电泳分离~X174一HaeⅢRFDNA片段，以603bp片段计算理论塔 板数 ”为 1．14×106．m ，271／281bp的分离度 R为 1．2。建立的PMMA微流控芯片DNA分析系统具有 制作和运行成本低，芯片可重复使用，分析重现性好等特点 。该研究可用于制作微型化便携式DNA分析仪， 应川于临床诊断、疾病筛查等领域。 关键词 聚甲基丙烯酸甲酯；微流控芯片；DNA分析系统 中图分类号：0657．8 文献标识码：A DOI：10．3964~．issn．1000-0593(2009)12—3379—04 专用试剂盒，分析费用高，主要用于科学研究，不易推广普 引 言 及。本文采用 自制的PMMA芯片，以光纤式半导体激光诱 导荧光为检测器，建立了芯片可长期重复使用 ，制作和运行 微流控芯片分析是当前分析科学发展的前沿和热点领域 成本低的小型微流控芯片DNA分析系统。 之一，通过分析化学、微机 电加工、电子学、材料学以及生 物学和医学等多学科的交叉，将取样、混合、孵化 、反应、检 1 实验部分 测等分析过程的各个组件集成于由微米级通道网络组成的微 流控芯片上，实现分析系统的微型化与便携化_1j。微流控芯 1．1 试剂和试样 片分析 自1992年诞生至今 ，已发展了多个研究方向，建立了 实验所用试剂均为分析纯，水为 18MQ．cm纯水。筛分 多个技术平台，但有效、实际的应用已成为今天微流控芯片 介质：2 (w／v)羟乙基纤维素 (HEC，Aldrich化学公司，美 分析进一步发展及商品化的瓶颈l2]。应用于临床诊断、疾病 国，MW 250000，)+1×TBE(89rnmol·L 三羟甲基氨基 筛查和食品安全的微流控芯片分析是最具进一步发展及商品 甲烷+89mmol·L 硼酸+2nunol·L 乙二胺 四乙酸， 化前景的微流控芯片分支领域之一。 Tris—boric-EDTA，pH 8．6)，含 0．5mmol·L 荧光染料 聚甲基丙烯酸甲酯 (PMMA)微流控芯片易加工，制作成 T(3-PRO-3(MolecularProbes，Eugene，美国，由包装浓度 1 本低，表面可采用物理或化学方法进行多种用途的改性，具 nunol·L 稀释而成)，经 0．45,／m滤膜过滤。涂层改性试 有较好的生物适应性及易在片集成多种用途功能组件的特 剂：2 (w／v)羟乙基纤维素+1×TBE，经 0．45 m滤膜过 点，已广泛 应H]于微流控 芯片生物分 析[3j。自 1995年 滤。50ng·L一~X174一HaeⅢRFDNA(TaKaRa公司，美 Ma