鱼皮胶原的分离与纯化.pdf

摘要 胶原是动物体内结缔组织的重要结构蛋白质，广泛分布在所有多细胞动物 的皮肤、骨骼、软骨、牙齿、肌腱、韧带、血管等中。它富含甘氨酸、脯氨酸、 羟脯氨酸，己广泛用于医药、食品、保健、化妆品等众多领域。由于受疯牛病 的影响，陆生哺乳动物胶原制品的安全性开始受到人们的质疑。因此，为了开 发新型胶原资源，同时提高淡水鱼加工废弃物的综合利用。本文以淡水鱼草鱼 为研究对象，对鱼皮胶原进行提取和纯化研究。 建立了测定原料中羟脯氨酸(Hyp)含量的碱水解法，并与酸水解法作了对 比。考察了NaOH的浓度、水解时问和碱液与样品质量比三种因素对测定结果 的影响。通过正交实验，确定了碱水解法的检测条件。与酸解法相比，碱解法 缩短了测定时间，重复性和一致性较好，回收率较高，可以代替酸解法测定原 料中的Hyp含量。 采用酸提取法对鱼皮胶原的提取与纯化。鱼皮经5％NaCl溶液(1：10，w／v)， 温度4C左右，24h磁力搅拌处理，除去可溶性杂蛋白。通过盐析实验确定最适 盐析浓度，胶原粗提液经盐析、透析。得到纯度约为93．00％的胶原溶液。结果 表明，淡水鱼鱼皮胶原酸溶性好，酸法对其提取率高，约为82．15％。 采用SDS—PAGE电泳对胶原制品的组成进行鉴定，同时对其特性粘度、热 稳定性等特性进行研究。结果表明，实验所提取出的是未变性的胶原，类型为I 型胶原，胶原的分子构型为【∞(I)】2啦(I)，特性粘度为14．3d垤，变性温度为 28．8℃。 关键词： 胶原羟脯氨酸提取纯化盐析 ABSTRACT isa s仃uctural that internal and helpssupport skin， Collagenmajor protein organs and isthe bodies．It fibrouselementof protects major skin，bone，cartilage，teeth， tendonand a of blood fibrous inall vessels，andcomprises family proteinspresent multicellular a of content and organisms．Withhigh glycine，prolinehydroxyproline， anditsis usedinmedical collagen treatments，healthcare，food widely processing， cosmetics andotherindustries．Theoutbreakofbovine spongiformencephalopathy resultedin USerSof fromdomestic (BSE)has anxiety among collagenpreparations animals．InordertO anew sourceand utilizefishoffal developcollagen rationallyup mechanical o