醋糟纤维素分解菌的筛选与环境适应性研究.pdfVIP

一 410一 江苏农业科学 2009年第 6期 醋糟纤维素分解菌的筛选与环境适应性研究 杨运克，朱咏莉，李萍萍 (现代农业装备与技术省部共建教育部重点实验室／江苏省重点实验室／江苏大学农业工程研究院，江苏镇江 212013) 摘要：以羧甲基纤维素钠 (CMC)培养基为基础培养基，从林地土壤、已经堆肥处理的锯末和醋糟、未经堆肥的新 鲜醋糟样品中初步分离筛选出l3株菌株。通过采用纤维素刚果红染色法测定其相对酶活力，进一步得到3株 (分别 命名为SL02、SI／34和SL10)分解纤维素能力较强的菌株。对这3株菌株分别进行温度 、碳源、氮源和酸碱度的适应性 研究，结果表明：SL10菌株的适宜生长温度为28℃左右，SIJD2、SL40 菌株则分别为28～31℃和25—31℃。醋糟和麸 皮的不同配比对菌株的生长影响较大，SL02菌株的适宜配比为2：3，SL02和 SL10菌株则分别为 1：4或0：5；以 NHNO，作为氮源，3株菌株均表现出较高的酶活性；SL40菌株生长的适宜pH值为6左右，SL02和SL10菌株生长适 宜的pH值为 8—9。 关键词：纤维素分解菌；醋糟；分离筛选 中图分类号：Q936 文献标志码：A 文章编号：1002—1302{2009)06—0410—03 醋糟是在制醋过程中排放出的有机废弃物，具有含水量 1 材料与方法 高、自然状态下难以发酵的特点，如何对其进行处理并加以利 用是 目前制醋行业面临的一大难题…。目前对醋糟的利用 1．1 纤维素分解菌菌种来源 主要集中在将其发酵后和其他有机物料 (如锯末 、芦苇末等) 试验采用的菌种来源于江苏大学校园内林地土壤、已经 配合用作食用菌 j和植物栽培基质等方面 ，并取得较好 堆肥处理的锯末和醋糟 、未经堆肥的新鲜醋糟。采用对角线 的效果。但由于传统自然发酵周期长、粗纤维降解率较低的 法进行样品采集 ，并及时活化培养。 原因，醋糟的利用率仍较低 ，这很难满足制醋行业 日益发 1．2 供试醋糟材料 展的需求。 试验所用的醋糟 由江苏恒顺醋业集团提供。基础性状 从 自然环境中筛选纤维素分解菌已经有很多研究报 为：全氮 1．36％、全磷 0．28％、全钾 0．30％、粗纤维含量为 道 。但对于不同的发酵材料、不同的环境条件和发酵工 2O％ 。 艺等，纤维素菌种类的要求有较大差异。因此，需要针对醋糟 1．3 培养基 的发酵筛选出适应性较强的菌种，并对其适宜的发酵条件进 (1)菌种生长培养基 ：PDA培养基 (培养真菌用)和 行研究以提高其发酵的腐熟效率。本研究从林地土壤、已堆 牛肉膏蛋 白胨培养基 (培养细菌用)。 肥的醋糟和锯末 、未进行堆肥处理的新鲜醋糟中分离筛选高 (2)固体初筛培养基 (CMC平板培养基) ：CMC—Na 效纤维素分解菌，并对其环境 (温度、碳源、氮源 、酸碱度)适 15g、MgSO ·7H2O0．5g、NH4NO31．0g、KH2PO 1．0g、琼脂 应性进行了初步研究。 2Og、H2O1000ml，121oC灭菌25min，过夜备用。 (3)液体发酵培养基：KH2PO 1．0g、MgSO ·7H2O 0．6g、NaC10．1g、NaNO32．5g、CaC120．05g、FeC130．01g、 收稿 日期 ：2009—03—25 醋糟(干燥后)20g、水 1000ml，pH值 自然，121℃灭菌 基金项 目：国家农业科技成果转化项 目(编号：2008GB2C100106)；江 25mi