水貂生长激素基因重组腺病毒构建.pdf

水貂生长激素基因重组腺病毒的构建 摘要 众所周知，水貂是一种具有很高经济价值的毛皮动物，研究表明，其皮张的大小和 皮毛的质量除了与种系，营养水平和饲养管理等因素有关外，还与水貂的生理状况密切 相关。水貂生长激素(mink growth 蛋白质激素，它是具有广泛的生理功能。实验证明，人工注射动物自身的生长激素，可 以明显加快其生长速度，增加体长，提高毛皮质量。但从水貂脑垂体提取天然生长激素 产量甚微，难以大范围的应用到生产实践，而基因工程技术和病毒载体的发展为有效的 解决这一问题提供了可能。本文主要利用腺病毒载体来生产基因工程水貂生长激素。 首先，在本室水貂生长激素基因真核表达载体的相关动物实验结果的基础上，将使 水貂增重明显的双启动子调控下的水貂生长激素基因真核表达载体pCMTmGH瞬时转染 结果表明在22KD附近有目的条带，证明该载体可以在真核细胞中表达水貂生长激素。 为之后采用双启动子构建水貂生长激素基因重组腺病毒穿梭质粒提供依据。 I酶切位点的水貂生长激素基因特 然后，根据需要设计两端分别带有Hin锄和Kpn 克隆载体，经酶切及测序结果表明已成功地扩出水貂生长激素基因并将上述两个酶切位 启动子调控下的水貂生长激素基因重组腺病毒穿梭质粒p／kECMTmGH，经酶切及序列测 定，证实已成功构建复制缺陷型的水貂生长激素基因重组腺病毒穿梭质粒。 最后，利用人类腺病毒载体，将水貂生长激素基因重组腺病毒穿梭质粒与含有腺病 生同源重组，经电镜和PCR鉴定，已成功构建出CMV和MT双启动子调控下的水貂生 长激素基因重组腺病毒。 关键词：水貂，生长激素基因，腺病毒载体 Constructionofrecombinantadenovirusofmink hormone growth gene Abstract As knowsthattheminkisakindoffuranimalwhichhas the research， everyone hi【gheconomyvalue．By thesizeandthe oftheskinarenot aboutwiththedifferent nourishmentand quality only species，the feeding also with the mink relatedthe conditionof mink．The level，butclosely physiology growth akindof fromthebrain hastheextensive hormonewhichexcreted cells；it protein adenohypophysis function．Ifthe hormoneWas tothe could increase animals’bodies，it physiology growth injected obviously their increase the