高考生物一轮复习考点解析学案：专题11.2 植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术（解析版）.docVIP

【2015高考考纲解读】 1.从生物材料中提取某些特定的成分 2．植物的组织培养 3．蛋白质的提取和分离 4．PCR技术的基本操作和应用 【2014高考在线】 1．（2014·北京卷）在25 ℃的实验条件下可顺利完成的是(　　) A．光合色素的提取与分离 B．用斐林(本尼迪特)试剂鉴定还原糖 C．大鼠神经细胞的培养 D．制备用于植物组织培养的固体培养基 2．（2014·四川卷）下列有关实验方法或检测试剂的叙述，正确的是(　　) A．用改良苯酚品红染色观察低温诱导的植物染色体数目变化 B．用健那绿和吡罗红染色观察DNA和RNA在细胞中的分布 C．用纸层析法提取菠菜绿叶中的色素和鉴定胡萝卜素提取粗品 D．用标志重捕法调查田鼠种群密度及农田土壤小动物的丰富度 3．（2014·江苏卷）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，错误的是(　　) A．酵母和菜花均可作为提取DNA的材料 B．DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水 C．向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物 D．DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝 C【解析酵母和菜花都含DNA物质，都可用来提取DNA，A项正确。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，所以DNA在2 mol/L的NaCl溶液或者蒸馏水中都能溶解，B项正确。鸡血细胞加水搅拌，细胞吸水涨破释放出DNA，DNA存在于溶液中，C项错误。DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应，冷却后变蓝，D项正确。 4．（2014·福建卷） [生物——现代生物科技专题] Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图： (1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。 (2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。 (3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的__________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______________酶的酶切位点。 (4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。 1．植物组织培养。 原理：细胞的全能性。 比较项目 植物组织培养技术 花药离体培养技术 相同点 理论依据 植物细胞的全能性 基本过程 外植体→愈伤组织→丛芽→ 生根→移栽；无菌技术及接种操作基本相同 影响因素 选材、营养、激素、pH、温度、光照等 不同点 选材 体细胞 生殖细胞(精子) 生殖方式 无性生殖 有性生殖 (2)过程：脱分化和再分化。 2．植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同。 特别提醒： (1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝，该部分不仅分生能力强，而且无病毒侵染。月季花粉的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养，且在花蕾期，因为此时质地幼嫩，花瓣未开，微生物不易侵入，容易消毒。 (2)剥离花药时，尽量不要损伤花药，同时要彻底去除花丝，防止对实验产生干扰。 (3)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 (4)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照，而后期均需光照。 3．植物激素与组织培养。 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： (1)在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 (2)使用顺序不同，结果不同。 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 (3)用量比例不同，结果也不同。 的值 DNA的提取与鉴定 1．基本原理。 (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L 的NaCl溶液中的溶解度最低。 (2)DNA不溶于酒精溶液。 (3)DNA不被蛋白酶所水解。 (4)DNA在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。 2．DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同。 2 mol/L NaCl 溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 溶解规律 DNA 溶解 析出 蛋白质 部分发生 盐析沉淀 溶解 NaCl溶液从2 mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大 3.DNA的析出与鉴定。 (1)析出：将处理