酶动力学模块软件求解米氏常数和最大反应速率的实验研究.pdfVIP

第19卷第4期 洛阳理工学院学报(自然科学版) VoLl9No．4 2009年12月 Journal InstituteofScienceand Science Dec．2009 ofLuoyang Technology(NaturalEdition) 酶动力学模块软件求解米氏常数和最大反应速率的实验研究 李丽1，施展2一，钱春香1 (1．东南大学材料科学与工程学院绿色建材技斗己研究所，江苏南京211189； 2．东南大学材料科学与工程学院，江苏南京211189；3．江苏博特新材料有限公司，江苏南京210008) 摘要：当前仍多用作图法求解酶动力学米氏方程中米氏常数和最大反应速率．本文介绍采用酶动力学模块求解 米氏常数和最大反应速率的办法．该模块是社会科学统计软件包中一项专门针对酶动力学数据分析的软件．通过 对比双倒数作图法和酶动力学模块法求解出的米氏常数和最大反应速率，发现虽然二者的结果非常接近，但后者 比前者需要的步骤少，时间少，人工少．故将酶动力学分析模块推荐给科研工作者，以供快速处理大量酶动力学 实验数据时使用． 关键词：酶动力学模块；米氏常数；最大艮应速率；米氏方程；双倒数方程 DOI：10．3969，i．issn．1674-5043．2009．04．001 中图分类号：0643．1文献标志码：A 文章编号：1674．5043(2009)04-0001-03 在酶动力学中，温度、pH及酶浓度恒定的条件下，底物浓度对酶促反应的速度有很大的影响。在底 物浓度很低时，酶促反应的速度随底物浓度的增加而迅速增加；随着底物浓度的继续增加，反应速度的 增加开始减慢；当底物浓度增加到某种程度时，反应速度达到一个极限值‰，。 P缸是酶的一个基本特征常数，它包含着酶与底物结合和解离的性质。从酶动力学米氏方程式可知， 米氏常数‰等于反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度，米氏常数的单位就是浓度单位，mol／L。 ‰与底物浓度、酶浓度无关，与pH、温度、离子强度等因素有关。对于每一个酶促反应，在一定条件下 都有其特定的值，因此可用于鉴别酶¨埘。 l双倒数作图法求解玩I和‰。x 目前测定‰和‰。，一般仍用作图法。作图法有很 l／y 多种，最常用的是双倒数方程作图法耻o，又称双倒数作 图法，该法是根据米氏方程的倒数形式，以11y对I／ISl 作图，可得到一条直线，如图l所示。其中直线在横轴上 ●● 的截距为．1憾。，纵截距为l／‰刚据此可求‰和‰。。。双 … 倒数方程的表达式如式(1)所示。 ／ ／ ◆丧 1 眨1 1 ／ ／ 了2耋面+i o) ／ ＼—————一—— 一X l／幅I 其中，．，为反应速度，‰为米氏常数，‰x为酶反 图I双倒敝作图法求解K．I和P。 应最大速度，阎为底物浓度。 2酶动力学模块求解眉m和Ymax的过程 Kinetics 酶动力学分析模块(Enzyme 力学的分析模块。本文使用的这两个软件版本是EnzymeKineticsModule 收稿日j胡：2009—10-16 作者简介：李丽(1979-)，女，河南洛阳人。博士研究生，主要从事微生物成矿材料方面的研究． 基金项目：国家自然科学基金资助项目． 万方数据 2