高效液相色谱-圆二色检测法分析甲霜灵的对映体纯度.pdfVIP

第34 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第4 期 2006 年4 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 525 ～ 528 高效液相色谱- 圆二色检测法分析甲霜灵的对映体纯度 陈胜文 林坤德 席 萌 刘维屏# （浙江大学环境科学研究所，杭州310029 ） （浙江工业大学环境科学研究中心，杭州310032 ） 摘 要 以手性农药甲霜灵为研究对象，使用非手性高效液相色谱在不拆分对映体的条件下，利用圆二色检 测器所测的各向异性系数（g ）测定手性对映体纯度。实验结果表明，g 与对映体过剩率（ee ）具有良好的线性 关系；通过比较g 所测ee 与手性色谱所测的ee ，二者所测ee 相对平均偏差小于3. 0% ，说明该方法具有较高 的准确性，可应用于手性化合物对映体纯度的测定。 关键词 圆二色检测器，高效液相色谱，对映体纯度，各向异性系数，甲霜灵 1 引 言 手性对映体的理化性质虽然极为相似，但其生物活性却不尽相同。有些手性药物仅单一对映体有 药理活性，而另一对映体则可能为无药效、起拮抗或副作用。如S-异丙甲草胺能除草，而其R 型的对映 异构体不仅不能除草还会致突变。所以对映体纯度的测定对于手性药物的合成、生产过程的质量监控 以及药理学研究和环境中手性物质的检测等具有十分重要的意义［1］。气相色谱（GC ）、高效液相色谱 （HPLC ）、毛细管电泳（CE ）、核磁共振（NMR ）等都是对映体纯度检测的重要手段，但一般要借助手性色 谱柱将对映体分离，或在分析之前进行衍生化处理［2 ～ 5 ］。 圆二色检测器（Circular dichroism ，CD ）是检测物质对左旋圆偏振光和右旋圆偏振吸收差异（A ）的 Δ 一种新型检测器。利用CD 的这种特性，可以在不分离对映体的条件下测定手性化合物的对映体纯度。 本实验以手性农药甲霜灵为研究对象，讨论了非手性HPLC-CD 法测定手性化合物对映体纯度的原理和 方法。 2 方法原理 ［6 ］ 手性对映体的纯度可有多种方法表示，本研究以对映体过剩率 （enantiomeric excess ，ee ）表示， ee = （CR - CS ）/ （CR + CS ） （1 ） 式中CR 和CS 分别为R 和S 体浓度，ee = 0 即为外消旋体。 光学活性物质对左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的摩尔吸光系数（ ［7 ，8 ］ ε ）不同，称为圆二色性 ，其值 以 （ = - ）表示，其中 和 分别为物质对左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的摩尔吸光系数。 Δε Δε εL εD εL εD 根据Beer-Lammbert 定律，光学活性物质对左旋圆偏振光和右旋圆偏振光吸光值的差异（A ）可表示为： Δ A = ·CL = （ - ）CL （2 ） Δ Δε εL εD