环境中纤维素降解菌群的筛选与降解活性分析.pdfVIP

四川化工 第 l2卷 2009年第 2期 环境 中纤维素降解菌群的筛选与降解活性分析 樊青青 刘艳丽 罗亚 田 付 蓉 (武汉理工大学资源与环境学院，湖北武汉，430070) 摘 要 分别从富含腐殖质的土壤，造纸厂原料堆放处和排污 口污泥中筛选得到9组纤维素分解能力 强且性能稳定的纤维素混合菌群S，S2，S3，S4， ，J，J，J。，J4。它们的初始培养条件为培养基初 始pH值 6～8，培养温度 5o~6o~C，静置培养。将这 9组混合菌群在各 自的最适温度和初始 pH 值下培养 3天，分别于 24h，48h，72h测定CMC酶活，测得的最高的三个 CMC酶活分别出现在 S 的72h，S2的48h和J1的48h，分别为 33．1，37．7和 34．1U ·mL～。 关键词 ：纤维素分解 混合茵群 筛选 纤维素是 自然界中分布最广、储量最丰富的一 别于 24h，48h和 72h测定它们 的羧 甲基纤维素 类可再生资源，占植物干重的35 ～50％，全球每 (carboxymethylcellulose，CMC)酶活。 年可产生纤维素类干物质达 10 吨以上[卜引，所以， 1 材料和方法 纤维素的分解利用对于解决未来的能源危机与环境 问题意义重大，因JtL~n何更有效地开发和利用纤维 1．1 培养条件 素资源已成为当今世界的热门课题之一。至今，已 蛋 白胨纤维素培养基(PCS)成分：蛋 白胨、酵母 有很多关于人工培养驯化纤维索降解菌的报道，其 膏、NaC1和纤维素 (滤纸条，杭州新华纸业有限公 大部分是以纯培养方法分离和筛选的[3]，但是有 司，双 圈牌 )各 5g ·I一，CaCO。2g ·I一， 研究表明由于微生物群落中不同菌种之间存在协同 K2HP04、MgSO4各0．5g·I～，微量元素溶液0．5 作用并相互依存，各菌种对环境要求苛刻等原因，大 mI·L_。，50~C静置培养，使处于溶解氧为 0．O2～ 部分在 自然界中的微生物都无法在实验室的培养基 0．4的微好氧环境。 上进行分离培养，常规的培养基分离培养的方法往 微量元 素液成分 (g ·I )：ZnSO4：0．30； 往只能得到很小的一部分信息。因此，近年在环境 CaC12：0．25；CuSO4：0．25；FeSO4：0．20。 中的纤维素分解研究上，混合菌的作用逐渐得到重 1．2 混合菌群的筛选 视。史玉英等分离筛选纤维素分解菌群[7]，证实了 从富含腐殖质的土壤，造纸厂原料堆放处和排 多种菌混合物分解活性显著高于单一菌种。崔宗均 污 口污泥 中取样 ，在 1．5em×15cm 的试管 内装 等E8-11]曾经以4种高温堆肥的产物为原料构建了 10mIPCS培养基，以滤纸条作为碳源，50E静止培 一 组高效稳定的纤维素分解菌混合菌群，把自然界 养。当瓶内滤纸条刚刚开始崩解时，摇匀取 1mI 中多种微生物协同降解纤维素的过程再现于人工培 培养液作为种子接到新鲜 PCS培养基 中。如此一 养条件下。 直传代培养，淘汰失去分解能力的培养物，留下分解 笔者从富含腐殖质的土壤，造纸厂原料堆放处 能力强的培养物。 和排污 口污泥中筛选得到了9组能稳定高效分解纤 1．3 培养温度对混合菌群降解滤纸纤维素的影响 维素的混合菌群，并对这 9组混合菌群做了最适温