AIY神经元对线虫化学趋向性的调控.pdfVIP

第 3l卷第4期 湖北大学学报 (自然科学版) V01．31 No．4 2009年 12月 JournalofHubeiUniversity(NaturalScience) Dec．，2009 文章编号 ：1000—2375(2009)04—0406—03 AIY神经元对线虫化学趋向性的调控 章雷，孟令峰，张蓉颖 (华中科技大学生命科学与技术学院，湖北 武汉 430074) 摘要：AIY神经元作为线虫重要的中间神经元，一般认为在线虫的温度感受中发挥功能．分别进行的苯甲醛 和硫酸铜的趋向性实验显示，AIY在线虫对于这两种化学物质的感受过程中起作用，而且对于硫酸铜的感受行 使抑制功能．苯 甲醛和硫酸铜的抉择实验显示，A1Y在线虫中能够对这两种物质引起的信号进行整合，在 ttx-3 突变体中AIY神经元仍然可以行使整合的功能．但是无法判断该整合的功能是否完全无缺陷． 关键词：线虫；AIY；化学趋向性 中图分类号：Q959．171；Q421；Q415 文献标志码 ：A DO1：10．3969／j．issml000—2375．2009．04．020 线虫因为其简单的体系和对于诸如接触、味道、气味和温度等外界刺激的敏感反应能力，日益成为 受人瞩 目的行为学研究的模式动物．化学趋向性是线虫行为学研究的一个重要分支．线虫在爬行过程中 选择趋向或者避免特定的化学物质的现象，称为化学趋 向性，由线虫的神经系统所介导．雌雄同体的成 年线虫的神经系统由302个神经元组成．这些神经元分为3类：感受神经元 (sensoryneurons)，中间神 经元 (interneurons)和运动神经元 (motoneurons)_】]．通过激光精确控制 “烧除”(1aserablation)特定神 经元的方法，人们已经基本解析出控制趋向性的大致神经通路：首先由线虫的某类感受神经元接受来 自 外界物质的刺激 ；然后将信号传递到中间神经元；在 中间神经元经过整合之后，信号被进一步传递到运 动神经元；运动神经元通过控制肌肉的运动，使线虫表现出对于外界刺激的特定反应_2]． AIY是一个重要的中间神经元，起到整合各种感觉信号的作用．根据报道，人们已知AIY神经元可 以通过接受来 自AFD温度感受神经元的信号，参与控制线虫对于温度的反应_l2]．电镜结果显示，AIY 也是许多化学感应和气味感应神经元的突触后部分l1]，我们猜想AIY可能也参与化学趋向性的调控． 通过分别使用苯 甲醛和硫酸铜对AIY发育缺陷型的线虫种系进行实验 ，我们证实了AIY参与线虫对 于这两类化学物质的感受．接着我们将该缺陷型种系同时使用苯 甲醛和硫酸铜进行抉择实验，观察到 AIY对于化学趋向性的信号整合也存在作用． 1 材料和方法 1．1 线虫种系 使用标准的线虫培养方法[3]．使用线虫种系N2作为野生型线虫，用于对照实验．使用 FK134种系作为ttx一3基因的突变种系，该种系第 5个外显子的剪切位点产生点突变． 1．2 行为学实验 1．2．1 苯甲醛(benzaldehyde)趋向性实验 配置好实验所需的行为学实验培养基(2 Agar，1mmol／L MgSO4，1mmol／ICaC12，5mmol／L磷酸缓冲液)，倒入 9cm平板 (testplate)，吹干，备用．将 100--300 条健康培养的成年线虫从NGM培养板中轻轻洗下来，反复洗 3次，将大肠杆菌洗净后滴在行为学实验 板正中心．待线虫分散完全后，迅速在一侧滴加 1 I1％苯甲醛，并在苯 甲醛后方滴加 1 I2Ommol／I 叠氮钠 ，盖上培养皿置于 20℃，1h后计数． 1．2．2 硫酸铜趋向性实验 用枪头吸取25 I100mmol／L硫酸铜，匀速划过行为学实验板，使得培养 收稿 日期 ：2009 03—19 基金项 目：科技部 国家重大科学研究计划蛋白质专项 (2007CB914200)资助 作者简介 ：章雷 (1982一 )，男，博士生；张蓉颖，通讯作者，Email：ryzhang@mail．hust．edu．cn 第 4期 章雷等：AIY神经元对线虫化学趋向性的调控 407 板被硫酸铜平均地分为A、B两个半圆部