用于检测小鹅瘟抗体的Dot-ELISA建立.pdfVIP

⑧ ~t1,~2009年第31卷第11期 ChinaPoultryVo1．31，No．11．2009 用于检测小鹅瘟抗体的Dot-ELISA建立木 布 日额 ，王君伟。一，吴金花 (1．内蒙古民族大学生命科学学院，内蒙古通辽 028043： 2．东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨 150030) 摘 要：以小鹅瘟病毒(GPV)VP1-VP3~重叠序列重组原核表达多肽为检测抗原，建立 了鉴别GPV全病毒抗体与VP3亚单位抗体的Dot—ELISA。该方法中检测抗原包被浓度为70ng／ 斑点，兔抗鹅IgG—HRP标记抗体的最适稀释度为1：200，被检血清最佳稀释度为1：400。特异 性试验的结果中，检测抗GPV抗体的阳性率为100％，而抗GPV-VP3禽痘重组病毒抗体的阳 性率为0，表 明其有很好的特异性与灵敏度 。 关键词：鹅细小病毒 ；GPV一(VP1-VP3)非重叠序列；斑点一酶联免疫吸附试验 Dot-ELISA forDetectingGooseParvovirusAntibody BU Rie，WANG Junwei一 ，WU Jinhua (1．CollegeofLifeScience，InnerMongoliaUniversityforNationalities， Tongliao，InnerMongolia 028043； 2．CollegeofAnimalMedicine，NortheastAgricultural University，Harbin，Heilongjiang 150030) Abstract：To identificatiegooseparvovirus (GPV)antibody andVP3subunitantibody。Dot-ELISA wasestablished with recombinantpmkaryoticexpressedpeptideofGPV-(VP1-VP3)non-repeatednucleotidesequences．Coatingdensity was70ng／dotin themethod．Theoptimum dilutionofrabbitanti-gooseIsG-HRPconjugatedantibodyand detected selum were 1：200 and 1：400，respectively．Spe cificity assay showed htat positive rates ofGPV antibody and sel1．in antibody agaist GPV-VP3 gene recombinant poultry poxviruswere 100％ and 0，respectively．Itwas showed thatthis method had high specificity and esnsitivity． Keywords：gooseparvovims；GPV-(VP1-VP3)non-repeatednuc|eotidesequences；Dot—EHSA 鹅细小病毒 (Gooseparvovirus，GPV)感染可 上与缺乏有效的检测方法具有一定的联系。通常 引起 4~20日龄雏鹅的急性 、败血性死亡 ，其发病 使用的抗体检测方法并不能将 GPV感染后所产 率及死亡率分别达到 70％~100％、90％~100％。长 生抗体与全病毒疫苗接种后获得的抗体明确区 期以来 ，该疫病始终未能得到有效控制[i-3]0其原 分开来，也不能鉴别基因工程亚单位疫苗接种所 因相当复杂，除了长期以来缺乏科学的免疫程序 产生的抗体。这给疫情监测、流行病学调查与基 和安全有效的基因工程免疫制剂外 ，在一定程度 因工程亚单位免疫制剂的应用带来 困难 。另外 ，