高速逆流色谱制备石杉碱甲单体工艺参数的研究及讨论(Ⅰ)——温度.pdfVIP

高速逆流色谱制备石杉碱甲单体 工艺参数的研究及讨论(I)——温度 陈建华，黄少烈，张扬，梁成满 华南理工大学．化工与能源学院．华工—普源天然产物分离纯化技术开发中心 中国．广州．510640 摘要以选定的溶剂体系及其它工艺参数为基础，研究温度对高速逆流色谱技术分离制备石杉碱 水温度为45C，此时管柱内固定相的保留值为64．2％且管柱工作压力为0．42MPa。 关键词高速逆流色谱饵sccc)；石杉碱甲；温度；工艺参数研为 、≮ 高速逆流色谱技术为液一液分配色谱技术，利用互不混溶两溶剂相中的一相为色谱分离的固 定相，而另一相为流动相。由于消除了固态载体的使用，其相对于传统柱色谱技术具有许多独特 之处。尤其适用于天然产物化学成分的分离与制备，具有极高的应用研究价值【l】。石杉碱甲是从 中国特有植物千层塔(蛇足石杉)中提取的一种生物碱。是中国独创的一种世界级新药，为真性 胆碱酯酶专一性抑制剂，对乙酰胆碱酯酶具有选择性抑制作用，而且毒性低，作用时间长，在国 际上已被列为第二代胆碱酯酶抑制剂，是目前治疗良性记忆障碍和早老性痴呆症最为安全有效的 药物之一…1。随着社会的发展、人口老龄化问题的突出，其市场需求量迅速增长，市场前景非常 看好，同样具有极高的研究价值。 石杉碱甲单体在千层塔植物干燥全草中的含量约为0．02％。且常伴有成分复杂、结构相似的 共生生物碱，应用常规的分离方法难以大量获得【4】。目前采用的生产方法为溶剂法，产品得率低， 生产周期长p”。有机合成石杉碱甲由于技术问题，目前尚未获得突破M。我们利用现代高新分 离技术——高速逆流色谱，以千层塔植物提取物为原料，对石杉碱甲单体的制备进行研究，获得 重大突破，取得一种分离周期短、产品纯度高、分离量大且分离过程稳定的工艺路线。本论文将 在选定的溶剂体系及其它工艺条件下，讨论高速逆流色谱分离温度对分离效率的影响。而与本课 题相关的其它研究工作业已完成，其研究成果将陆续在其它论文中发表。 1．仪器及溶剂 本论文的研究工作所应用的仪器设备均为华南理工大学与广州普源生化科技有限公司合作 组建的华工一普源天然产物分离纯化技术开发中心所配备的实验仪器，主要为： IBE--300A分析与半制备型高速逆流色谱主胡．-一上海同田生化产品； AKTA Pharmacia Prinle系统(主要含泵、检测器及分布收集器等)——Am∞hmBiotech产 品： 千层塔植物提取物：约5％石杉碱甲含量，宁波立华制药有限公司； 作者简介：陈建华(1979．05一)，男(汉族)，福建泉州人，工学硕士，从事天然产物 分离与纯化技术研究(如高速逆流色谱、分子蒸馏及超临界萃取等)，chejhch@sohu．corn 190 Pr岫eView Pharmacia 2．0色谱工作站--Amersham Biotcch产品 Pharmacia Biotcch产品 MultiThem[II恒温水浴一Amersham n-Hcxanc：分析纯。天津市津沽工商实业公司； n．BuOH：分析纯，天津市化学试剂一厂； 双蒸水：双蒸自制 2实验及结果 2．1研究方法 利用实验系统的恒温模块，通过设置恒温水浴循环水的温度，从而控制管柱中两相溶剂间的 工作温度，进而在选定的溶剂体系及其它工艺参数的条件下进行温度影响分离效率作用的研究。 2．2实验步骤 下平衡过夜；根据石杉碱甲的结构特性，利用一定的方法把千层塔植物提取物处理成石杉总碱； 取少量石杉总碱用高速逆流色谱溶剂体系配制样品溶液；启动高速逆流色谱系统，并设定预选的 各工艺参数，上样进行分离实验；通过紫外检测器等进行在线检测，并通过分布收集器收集洗