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 2011年 研究生疾病模型复习题 1．简要回答抓取家兔的方法及需注意事项。 答：抓取家兔时，一般用右手抓住兔颈背部的毛皮提起，用左手托住臀部或腹部，让其身体的重量集中在左手上。注意避免用手抓兔耳提起，因兔挣扎，容易抓不稳脱手而摔伤动物。 2．在动物实验中，对照的作用是什么？ 答：对照的作用在于减少和抵消非处理因素的干扰，以便分析处理因素的作用。 3．简要回答灌胃给药的优点和不足。 答：灌胃给药一般能准确掌握给药量、给药时间，并能发现和记录症状出现的时间和经过。但由于每天强制性灌胃给药操作，会对动物造成一定程度的机械性损伤和心理影响，要求熟练掌握灌胃技术。 4．称量脏器重量时，解剖前为什么要应禁食12h左右？ 答：一方面解剖前常取血检测生化指标需要禁食，另一方面禁食后动物体重不受食物的影响。 5．低温保存的血清样品应如何使之融化？ 答：不能在室温慢慢溶解（融化），而应放在25℃~37℃水浴中短时间快速溶解（融化），充分混匀。 6. 成功复制动物模型主要取决于哪三方面的因素？ 答：一是实验动物选择得当；二是动物的饲养环境适宜；三是造模的方法选择适宜和技术操作正确。 7．动物实验设立对照的作用？常用对照的形式？ 答：对照的作用在于减少和抵消非处理因素的干扰，以便分析处理因素的作用。对照的形式主要有空白对照、实验对照、配对对照、标准对照等。在药效学研究中常用的对照组有：阴性对照组（或空白对照组，包括用生理盐水或溶媒代替药液同量给予者）、阳性对照组（给予已知药效的典型药物）等。 8．给大鼠、小鼠腹腔注射的要点。 给小鼠腹腔注射（intraperitoneal injection，ip）时，左手抓取并固定动物，将腹部朝上，头部略低于尾部，右手持针，在下腹部腹白线稍向左的位置，从下腹部朝头的方向平行刺入皮肤。针头到达皮下后，向前进针3~5mm，再把针竖起，使针头与皮肤呈45o角刺入腹肌。针尖穿过腹肌进入腹腔后抵抗感消失。回抽针栓，如无血液或异常液体，可缓慢注入药液。 9．简述集落形成法的基本原理。 答：集落形成试验又称克隆形成试验，是评价抗肿瘤药物作用的简便、可靠的体外方法，目前较为常用。 基本原理:克隆是指一个细胞在特定条件下培养增殖而产生的细胞群。单个细胞在体外连续增殖6代以上时，其后代所组成的细胞群体称为克隆或集落，每个克隆可含50个以上的细胞，大小为0.3~1.0mm。能形成克隆的细胞称为克隆原细胞，也成干细胞，是具有持续分裂能力的细胞。肿瘤细胞的生长、转移、复发均以干细胞的增殖为基础。当接种的细胞分布较稀疏时，每个克隆彼此不接触，通过克隆计数，可对单个细胞的增殖能力进行定量分析，故能较灵敏地检测药物的抗肿瘤活性。集落形成试验可分为平板和软琼脂两种试验。 10．回答用沙鼠复制全脑缺血模型的造模机制。 答：沙鼠大脑动脉环的后交通动脉缺乏或非常纤细，颈内动脉系统和椎-基底动脉系统之间没有血液交通，故结扎两侧颈总动脉可造成全脑缺血。 11．目前欧美国家普遍主张动物实验实行“3R原则”，请简述“3R原则”的具体内容。 答：“3R”即替代、减少和优化。 替代：是指以单细胞生物、微生物或细胞、组织、器官甚至计算机模拟等替代活体动物进行实验。 减少：就是选用恰当的高质量的实验动物进行动物实验，改进实验设计，提高实验的精确度和实验动物的利用率，尽可能减少实验中所用动物的数量。 优化：是指以良好的条件善待动物，精密设计研究路线，选择合适实验手段，减少实验动物的紧张和痛苦，得出更好的实验结果，保证实验结果的可重复性。 12．动物模型在研究人类疾病中的意义和作用。 答：优越性：①利用动物进行模拟实验，可免去对人体的伤害。②可以严格控制条件，排除各种干扰。③提高复制成功率和缩短病程，便于实验的多次重复。④便于实验样品的全面采集。 局限性：①用一种动物得出的实验结果，不一定适用于另一种动物。②如果想肯定一个实验结果，最好采用两种（啮齿类和非啮齿类）以上的动物进行比较观察。③使用动物模型所得出的结论更不能直接地、简单地照搬于临床，通过动物模型筛选的药物必须再经临床试验的检验。 13．简述抗肿瘤药物作用的MTT法的基本原理。 答：MTT是3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑的缩写，商品名为噻唑蓝，是一种能接受氢原子的黄色粉状染料，分子量414.3，溶于水性溶剂和有机溶剂，常温下需较长时间才能溶解。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶在细胞内可将黄色MTT还原成不溶性的蓝紫色甲臜，而死细胞中此酶消失，MTT不能被还原，因此甲臜的生成量通常与活细胞数成正比。用DMSO溶解细胞中的甲臜后，用酶标仪在一定波长下测定习惯度（A）值，即可定量测出细胞的存活率。 14．重组基膜侵袭实验（又称Boyden小室肿瘤侵袭实验）的基本原