人血浆中重组人甲状旁腺素rhPTH(1-84)及其代谢产物rhPTH(1-34)的浓度测定及药动学研究.pdfVIP

人血浆中重组人甲状旁腺素rhPTH(1．84)及其代谢 产物rhPTH(I．34)的浓度测定及药动学研究 周杏琴张建康蔡刚明钦晓峰曹国宪 (江苏省原子医学研究所，卫生部核医学重点实验室， 江苏省分子核医学重点实验室，江苏，无锡214063) 【摘要l目的测定人血浆中重组人甲状旁腺素rhPTH(1-84)及代谢产物RhPTH1-34的浓度并进行 药代动力学研究，为临床制定安全合理用药方案提供理论依据。方法采用ELSA-PTH放射免疫分析 法测定^血浆中rhPTH(1-84)的浓度，RK-055-08 的浓度。结果rhPTH(1-84)在24～520 Pg·mL-1范围内呈线性关系，线性回归方程： Y=19．791X(112=O．9989)；rhPTH(1-34)在10—1280 Pg·mL-1范围内呈线性关系，方程：Y-A2+ 药代动力学主要参数Cmax：114．71士15．3(1u (4“g／kg)；rhPTH(1-34)主要参数Cmax：86．09士8．35(Iug／kg)，93．08±10．4(2pg／kg)， 119．15±7．24(4“g／kg)． PTH(1-34)测定 结论采用ELISA-PTH试剂盒测定人血浆中rhPTH(1-84)的含量和采用RK-055-08 人血浆中rhPTH(1-34)的方法是可行的，其特异性、灵敏度、精密度和准确度均符合我国生物制品 药代动力学研究的要求。 【关键词】放射免疫分析，RhPTH1-84，RhPTH1-34，人血浆，药代动力学 l前言 随着社会的发展，世界人口趋于老龄化，骨质疏松症患者也大量增加，有效的骨质疏松症治疗 药物的研究及用药安全等问题已极为迫切。骨质疏松症治疗药物有两类，一类是通过抑制破骨细胞 形成而抑制骨的吸收来减缓骨钙的丢失，这类药物有二膦酸盐等；另一类是刺激骨形成、增加骨质 合成的药物，有甲状旁腺激素及甲状旁腺激素相关肽、他汀类等。 甲状旁腺激素(PT}I)是一种可以刺激正常骨组织更新、维持机体钙磷代谢平衡的一种重要的调 钙激素，还有增加骨密度，改善骨结构的重要功能，因而成为临床上较有前途的治疗骨质疏松症的 准IWS rhPTH(卜84)与人体内发挥生理作用的PTH氨基酸序列完全一致。在国外所进行的临床前研究中发现 段可刺激骨胶原合成而促进骨形成。 本文建立放射免疫测定法测定注射用重组人甲状旁腺素rhPTH(卜84)在人血浆中的浓度及其血 浆中代谢产物rhPTH(1—34)的浓度并进行药动学研究；为新药临床试验提供试验数据，为临床制 定安全合理用药方案提供理论依据。 2实验部分 2．1仪器与试剂 2．1．1仪器及器材 1470 Wizard型放免T测量仪(Perkin 控温水浴锅(上海苏达实验仪器有限公司)。 149 2．1．2试剂 甲状腺素放免试剂盒(ELSA-FTH，法国CisbioInternational公司；RK．055-08PTII卜34，PHOENIX 20腿(约200U)／瓶)。 2．2实验方法 2．2．1标准溶液的制备及线性关系 177、520、1850 Pg·mL～，分别取各标准品200PL加入ELSATUBES，加入100虬125I—antiPTH振荡， 25℃放置过夜，弃上清，加Tween 线性范围：24520Pg·mL～． 含重组人甲状旁腺素(卜34)标准品10，20，40，80，160，320，640，1280Pg·mL。的血浆样品，按 放免分析操作流程操作，建立标准曲线。以血浆样品中重组人甲状旁腺素(1-34)的浓度的对数为横 Pg·mL-1。 2．2．2回收率及精密度 精确称取P11I卜84标准品适量，配置低、中、高(25、250、500 Pg·mL-1)三个质控浓度；PTHl-34 小