人类人工染色体的构建策略.docVIP

人类人工染色体的构建策略摘要： 目前各种应用于基因治疗领域的载体均存在一定的局限性。越来越多的研究者认为，最理想的基因治疗载体应该在染色体的结构基础上构建，使目的基因整合后能够作为独立的功能单位表达，或者成为游离基因而稳定存在。人类人工染色体（human artificial chromosome, HAC）的出现，使这种设想成为可能。近年来，研究者们基于两种基本策略相继构建多种HAC，并以之作为载体进行了一系列外源性基因表达研究，尽管还有许多问题亟待解决，但并不妨碍人们对之成为理想的基因治疗载体寄予厚望。关键词： 人类人工染色体； 载体； 基因治疗中图分类号： R394理论上讲，理想的基因治疗载体应该完全由天然染色体成分组成，至少具备三个结构要素：复制原点、端粒和着丝粒。当其进入靶细胞后，目的基因能够模拟自然条件下基因表达或者作为游离基因而稳定复制，即可控性表达，这是基因治疗成功的关键所在。外源性基因进入靶细胞后，若其表达处于失控状态，将带来严重的后果。最理想的可控性模式是模拟人类基因自然状态下的调控形式，实现这种可控性表达需要目的基因全长或包括上下游的调控区及内含子，这就对载体系统提出了极高的要求，它必须具备数十个kb到几百个kb的包装能力，同时还要考虑到重复序列的DNA重排和丢失问题；其次，一个如此长的片段进入细胞内，其整合位点相当重要，最终理想是能够实现定点插入，或