酶联免疫吸附试验与研究影响因素.ppt

酶联免疫吸附试验的 影响因素 检验科 实验过程中的影响因素 一、标 本 血清标本 采血试管 1.使用非抗凝标本(血清); 肝素抗凝血浆会增加OD值;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA检测系统中辣根过氧化物酶活性; 2.最好使用一次性玻璃试管或真空采血管. 标本采集后,应先将标本37°放置 30-60分钟后采用3000r /min离心15-20分钟,取 上清液加样。 标本的离心 强行离心分离血清,会使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块或附着在酶标板孔壁内使酶标记物不易洗掉,易造成假阳(阴)性结果。 标本的保存 1. 一周 ---- 2~4℃ 保存; 2. 超过一周 ---- 建议-20℃保存。 3. 冰冻血清融解后,蛋白质会出现局部浓 缩而分布不均,加样前应充分混匀。 标本的保存 4. 混浊或有沉淀的血清标本应先离心或 过滤,澄清后再检测。 5. 作多次检测,宜少量分装冰存; 6. 血清标本宜在新鲜时检测尽量避免细 菌污染。

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