色谱峰纯度的定性方法44597.pdfVIP

色谱峰纯度的定性方法 黄 芳 康继宏 郁 建 胡育筑 （中国药科大学 南京 210009） 提要 较系统地介绍了近年来国内外文献中有关色谱峰纯度的定性方法— 仪器方法和化学计量学方法。仪 器方法重点介绍了归一化比较光谱、吸收比法、光谱抑制法及导数技术。化学计量方法介绍了主成分分析法和 渐近因子分析法。通过对文献方法和应用的简单介绍，比较了各种方法的特点及优缺点，总结了规律。 关键词 色谱峰纯度，仪器方法，化学计量学方法，色谱法 在990以上。这种鉴定方法的灵敏度主要取决于物 1 前言 质和杂质的光谱区别、相对吸收度及保留时间的差 在应用色谱法分离复杂物质时，色谱峰的纯度， 别。最近Sievet等人 通过直接计算吸收光谱对之 即一个色谱峰究竟是由一种组分构成还是包含了两 间的相关系数，有效地鉴定了多肽牡的重叠峰。 种或两种以上的成分，成为人们首先关心的问题。 2.2 吸收比法 A（bsorbanceratio，简称AR） Davis 曾统计过，实际色谱图中仅有20％为纯组分 对于任何在紫外-可见光区有吸收的纯物质在 峰，重叠峰占绝对多数。色谱峰纯度的鉴别已成为色 两个选定波长下的吸收比为一常数，且与浓度无关。 谱分析的中心问题之一。色谱峰纯度的定性方法国 在组分的洗脱过程中，吸收比应恒定。以这一比值K 内外已有不少报道。归纳起来，这些方法可分为两 对分析时间作图，纯物质应是恒定K值的方波形。 类：一类是仪器方法，一类是化学计量学方法。 杂质存在将使其产生扭曲。比值图不仅可以用于估 计峰纯度，而且还可确定峰种类 〔〕。吸收比法的可 2 仪器方法 靠性依赖于波长的选择及吸收值的差别9〔l1，波长 应尽量选择在具有最大吸收差别处 〕〔。 从原理上分，仪器方法可分为比较法、吸收比 在多波长吸收比法M（ultipleabsorbanceratio） 法、光谱抑制法和导数技术等。在单通道UV/VIS 中4?〔2 〕用多个波长代替双波长，可使吸收比法的 检测中，常应用峰向量分析2〔〕或者导数色谱 3〔〕方法， 选择性和灵敏度都会提高 1974年Ostojic15〕首先从 通过比较标准品和被测物质的峰形来判断是否有杂 理论上认识到多重数组能使色谱峰的鉴定变得容 质存在。由于色谱峰形常受多个因素影响，所以用峰 易。仪器重复搜索找到光谱最大吸收波长并给出信 形判断杂质很不可靠。双波长检测器及多通道检测 号，其它波长信号比值沿色谱图给出，可直观显示所 方法的出现使吸收比法和各种峰抑制技术迅速发展 有峰的纯度。 了起来。 Marr等人 ?〔〕提出的多吸收比相关性理论 M（ul- 2.1归一化比较光谱(Normalizingandcomparing tipleabsorbanceratiocorrelation，简称MARC）是 spectrafro