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利用ISSR分析中国原生董棕植物遗传多样性 摘 要 董棕为棕榈科鱼尾葵属常绿乔木，它是我国稀有大型棕榈植物，自然资源少， 主要生于海拔370--2000m处的山坡和沟谷中，是国家二级保护濒危种。本文通 过ISSR分析了董棕的遗传多样性并借助对叶绿体trnK基因的内含子matK序列 分析，初步研究了中国原生鱼尾葵属4种属间的系统发生。 从董棕新鲜叶片中采用CTAB法摸索和提取董棕叶片基因组DNA，找出最 合适的提取条件和药剂用量。在此基础上，对董棕ISSR-PCR进行扩增，从100 条ISSR引物中筛选出可以扩增出清晰、重复性好的15条带的引物，15条引物 对109份材料共扩增出163条带，扩增条带分子量大小在0．1—2kb之间，其中156 条带具有多态性，其多态性百分率为95．7％。各引物扩增条带数在5一17条不等， 平均为ll条。董棕的遗传多样性及分化系数由POPGENE软件获得。董棕物种 值为0．4937，即49．37％的变异存在于种群间，50．63％的变异存在于种群内，说 明董棕的遗传变异存在于种群内与种群间。Nei’s遗传多样性指数h为0．2866， Shannons信息指数I为0．4370。 由UPGMA法获得的基于Nei’S的无加权计算遗传距离董棕各种群的聚类图。 各种群的遗传距离在O．0178一O．3664之间。其中蒙自种群与田心种群间的遗传距 离最小，那坡种群与龙树冲种群间的遗传距离最大。说明种群间的分化程度较高。 种群的UPGMA聚类的结果表明：董棕13个种群聚成可以分成三大类群： 第一类群包括友谊关、水口镇、新联和弄达，其中友谊关和水口镇的亲缘关 系较近，聚为一小类，新联和弄达聚成一小类。 第二类群包括广西植物园、安德镇、那坡、上长湾、田心、蒙自园林局和马 关。此类群分类复杂，又细分两个分支。一个分支包括广西植物园、安德镇和那 坡，另一个包括上长湾、田心、蒙自园林局和马关。 第三个分支比较小，仅仅包括兴街和龙树冲两个种群。 董棕种群内存在巨大的遗传变异，适应力强。丰富的遗传多样性为董棕提供 了变异的源泉。董棕分布广，栽培历史悠久，但野生种群都比较小，多呈岛屿状 ．1． 利用ISSR分析中国原生董棕植物遗传多样性 分布格局，提出了董棕的保护策略。 测定了4种中国原生鱼尾葵属植物matK序列。结果显示，鱼尾葵属的matK 序列存在一定的信息位点，但是较为保守；通过对其matK序列的聚类分析表明 系统树有两个分支，一支为鱼尾葵，另一支为董棕、单穗鱼尾葵和短穗鱼尾葵， 其中董棕与单穗鱼尾葵亲缘关系最近。这种分类与形态学的分类有些差别。 关键词：董棕；ISSR；matK 利用ISSR分析中国原生董棕植物遗传多样性 Abstract urensLinn．isoften the is rare tree，it Caryota green OHlcountry large-scalepalm naturalresourceare hadbeenbornintheelevation370．2000m plant，the fe、M mainly hillsideandthe place run-o行ditch．Itisthenationaltwolevelsof isin protections imminent research China dangerplants．Sequencepreliminaryanalysis primary hasbeen4kinds tm