巢式PCR动态检测围手术期脊柱结核患者外周血MTB-DNA初步研究.pdf

巢式PCR动态检测围手术期脊柱结核患者外周血 MTB-DNA的初步研究 中文摘要 chain reaction，PCR)检测脊柱 目的：通过巢式聚合酶链反应(polymerase 结核患者围手术期外周血及病灶标本的结核分枝杆菌脱氧核糖核酸 tuberculosis nucleic (mycobacteriumdesoxyribore 因表达，探索其在临床上快速诊断脊柱结核的应用价值；当患者一般情况好而血 沉尚未正常时，通过巢式PCR动态观察“术前超短程化疗(3．7天)”后脊柱结核 患者手术前后外周血中MTB．DNA量的变化，初步探讨“术前超短程化疗”后手术 的安全性。 柱结核患者，分别采集术前1天、术后l天、术后7天、术后14天的外周血作 为外周血实验组。从上述患者病灶中采取的脓液、肉芽组织25份作为病灶组织 实验组。取自同期因非结核仅椎间盘突出而住院手术的25例患者的术后1天外 周血25份及椎间盘髓核组织25份为对照组。采取巢式PCR检测各实验组及对 25例外周血实验组脊柱结核患者进行血清结核抗体检测及病灶组织实验组25例 脊柱结核患者按1995年中国防痨协会公布的结核病诊断细菌学检验规程进行病 灶组织直接涂片抗酸染色找抗酸杆菌。 结果：巢式PCR检测外周血实验组中100份外周血标本及病灶组织组25份 病灶组织标本中的MTB—DNA的IS61 10基因，所有扩增产物均为阳性，阳性率 周血标本及其25份椎间盘髓核组织共50份标本，仅1例假阳性，假阳性率为2 ％(1／／50)，说明本实验设计的巢式PCR特异性为98％。南华大学附一医院检验 科对25例外周血实验组脊柱结核患者进行血清结核抗体检测阳性率为56％，对 病灶组织实验组25例脊柱结核患者进行病灶组织直接涂片抗酸染色找抗酸杆菌 检测阳性率为32％，比较这三种检测方法的检测效果，巢式PER明显优于血清 结核抗体检测法及病灶组织直接涂片法(氏0．01)。巢式PCR动态检测25例“术 前超短程(3～7天)强化抗痨”的脊柱结核患者围手术期100份外周血标本中的 与术前1天比较无显著性差异(P0．05)。 结论： 1．根据IS6110基因设计两对特异性硫化修饰引物，结合高效保真聚合酶建立 的巢式PCR检测结核分枝杆菌具有较高的灵敏度和特异性，对于临床上快速检测 和诊断脊柱结核具有很好的实用价值。 2．在抗痨药有效及峰持全程抗痨的前提下，如果患者一般情况好，“术前超 短程(3-7天)强化抗痨”后手术的脊柱结核患者围手术期是比较安全的。 关键词：脊柱结核；结核分枝杆菌；巢式PCR；DNA 4 DetectionoftheMTB—DNAin Bloodof Dynamic Peripheral Patientswith TubucolosisPCR Perioperative Nested Spine by Abstract Objective：The aimedto valueofnestedPCR presentstudy explore(1)the in of tuberculosisthedetectionof 11 techniquediagnosis IS60 rapid spinal through Ge