产蛋白酶的海洋放线菌的初步研究【毕业论文】.docVIP

本科毕业论文 （20 届） 产蛋白酶的海洋放线菌的初步研究 专业：生物科学 目录 摘要 II Abstract II 引言 1 1 材料与方法 4 1.1 实验材料 4 1.1.1 培养基与试剂 4 1.1.2 仪器与设备 5 1.2 实验方法 5 1.2.1 菌株的分离纯化 5 1.2.2 菌株的筛选 6 1.2.3 产胞外蛋白酶放线菌株的酶活测定 7 2 实验结果与分析 9 2.1 分离纯化结果 9 2.2 筛选结果 10 2.3 酶活测定结果 12 2.3.1 酪氨酸标准曲线的绘制 12 2.3.2 酶活的计算结果 13 3 讨论 15 3.1 斜面保存法 15 3.2 菌种筛选方案 15 3.3 缓冲溶液的pH选择 15 3.4 蛋白酶活力测定 15 3.5 本研究的目的意义 15 4 小结 15 参考文献 17 致谢 19摘要 [摘要] 本文以从舟山海域潮间带海泥，海水中提取的海洋放线菌为研究对象，利用平板透明圈法分离出其中具有蛋白酶活性的放线菌，并观察目的菌株的菌丝和检测目的菌株的酶活力情况。蛋白酶是一类很重要的水解酶类，是一类常用的工业和研究用酶。蛋白酶参与蛋白质的水解、消化、血液凝固与血栓溶解、血管形成、炎症、受精以及细胞生长和维持细胞的形态等。自1945年瑞士Dr.Jaag等发现微生物碱性蛋白酶以来，由于其广泛的用途，已成为当前国内外研究的热点。微生物是蛋白酶最重要的来源，所产的蛋白酶较动物、植物来源的蛋白酶易于分离、纯化。放线菌是微生物的一种，主要从泥土、泉水、土地、土壤及海水附近等环境中分离得到，具有独特的基因类型、特殊的生理机制及特殊的代谢产物。研究结果表明：舟山海域潮间带海泥中，一共提取到了63种菌株，其中8株在酪素筛选平板上都产生明显的蛋白水解透明圈，对其中2株具有较大酶活力的菌株，采取以酪蛋白为底物的紫外分光光度法进行酶活测定。对于进一步发挥经济效益，寻找和开发放线菌资源无疑是的。Abstract Preliminary research of the marine actinomycetes with protease activity [abstract] This paper use the marine actinomycetes which extracted from the mud of Zhoushan ocean and seawater for study, the experiment use flat transparent ring method to isolate the actinomycetes which have protease activity , and observe the mycelium of the purpose of strain, and test the enzyme activity of the purpose of strain . Protease is a very important kind of hydrolysis enzymes,commonly industrial and research enzyme. Protease involves in protein hydrolysis, digestion, blood clots, thrombolytic, angiogenesis, inflammation, fertilization and cell growth and maintains cell morphology, etc. Since 1945,when the Swiss Dr.Jaag etc found microbial alkaline protease, protease because of its wide range of uses, has become the hot spot of current domestic and international research. Microbes are the most important source of protease. protease ,which are from animals, plants ,are easy to separate, purify. Actinomycetes which is a kind of microorganisms, are mainly isolated from soil, water, land and soil environment, have unique gene types, special physiological mechanism and sp