抗新城疫病毒中药组方的筛选及其抗病毒作用.pdfVIP

畜牧与兽医2014年第46卷第5期 ·87· 抗新城疫病毒中药组方的筛选及其抗病毒作用 刘坤1’。，邹海涛1”，李燕荣1”，李云岗2，刘家国1，姜平1，兰邹然1加 (1．南京农业大学动物医学院，江苏南京210095； 2．山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南250022) 摘要：首先从三七总皂苷、菊花总黄酮、黄芩苷、氧化苦参碱、板蓝根生物碱、黄芪多糖及板蓝根多糖中选取三种中药成分按照一定比例组成 10个中药组方，随后将这些组方先在细胞上筛选，选出抗新城疫病毒作用较强的组方，最后应用鸡胚接种试验验证其抗病毒活性。结果表明，通 过细胞筛选，组方l、5、6、7、9、lO的抗病毒效果最好，通过鸡胚接种试验测定后各组方试验组的血凝价显著低于病毒对照组，说明各组方均 有较好的抗病毒作用，并且不同加药方式及药物浓度均对其抗病毒能力有一定的影响。 关键词：中药组方；新城疫病毒；DFl；抗病毒作用 中图分类号：853．72 文献标志码：A 文章编号：0529—5130(2014)05—0087—05 由于病毒具有独特的生物学特性以及致病机理， 对于病毒性疾病还缺乏特别有效的治疗方法…。因 此研发高效、低毒的新型抗病毒药变得尤为重要。近 5 年来，很多研究已经证实，一些中草药或其提取物都 膜过滤除菌，分装，4℃避光保存；0．25％胰蛋白酶 可以应用于抵抗病毒感染。新城疫病毒(NDV)是 一EDTA，分装，一20℃保存；裂解液二甲基亚砜 影响全球养禽业的重要病原之一，感染后具有很高的 (DMSO)，室温保存。 发病率和病死率，不仅引起巨大的经济损失，还严重 1．3主要仪器 阻碍国内、国际的禽产品贸易，因此，新城疫病毒常 常被用于抗病毒药物筛选研究。本试验在运用细胞筛 选出7种具有较强抗NDV中药成分(另文报道)的 疫检测仪，美国伯乐；YP600电子分析天平，上海天 基础上，将7种中药成分中的任3种按照一定比例组 平仪器厂；wz一2A微量振荡器，北京海淀电子医疗 成lO种组方，在细胞上筛选出抗病毒作用较强的中 仪器厂；细胞培养瓶、24孔细胞培养板及96孔细胞 药组方，然后通过鸡胚接种试验验证其抗病毒活性， 培养板，德国Nuclon公司。 为临床上应用中药产品抵抗新城疫病毒感染提供理论 1．4中药组方的筛选 依据。 将6种中药成分用2％细胞维持液配制成含量为 5mg／mL的液体，常规过滤除菌，以此为初始浓度， 1材料与方法 倍比稀释进行预试验测定药物的最大安全质量浓度旧1 1．1试验材料 (氧化苦参碱、板蓝根生物碱、板蓝根多糖， 三七总皂苷、菊花总黄酮、黄芩苷、氧化苦参 2 碱、黄芪多糖及板蓝根多糖中药提取物粉末，购自西 安普莱特生物工程有限公司；新城疫病毒F48E8株， 由山东省农业科学院家禽研究所惠赠；10日龄SPF 最大安全浓度并按照一定比例组成10个中药组方。 鸡胚。 组方l(板蓝根多糖、黄芪多糖、黄芩苷)，组方2， 1．2主要试剂 (板蓝根生物碱、黄芩苷、黄芪多糖)，组方3(氧化 DMEM高糖细胞培养液(Hyclone公司产品)， 苦参碱、菊花总黄酮、三七总皂苷)，组方4(黄芩 加入胎牛血清(Hyclone公司产品)，含血清10％为 苷、氧化苦参碱、黄芪多糖)，组方