大鲵致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定与药敏试验.pdfVIP

·56· Animal Medicine2010 V01．42No．3 Husbandry＆Veterinary 大鲵致病性嗜水气单胞茵的分离鉴定与药敏试验 徐景峨h，余 波h，文正常h’，方开志2，黄家良2，唐杰2 (1．贵州省畜牧兽医研究所，贵州贵阳550005； 2．贵州省贵定县畜牧局，贵州贵定551300) rRNA序列分析 摘要：从患皮肤溃烂的大鲵体内分离到一株细菌，经人工回归感染试验证实该菌株具有较强致病力；通过生理生化鉴定和16S 分离菌株为嗜水气单胞菌。该分离菌株对头孢噻吩、庆大霉素、氟哌酸、头孢三嚎高度敏感，对强力霉素、头孢唑啉、卡那霉素中度敏感。 关键词：大鲵；嗜水气单胞菌；药敏特性 中图分类号：$852．61 文献标识码：B 文章编号：0529-5130(2010)03—0056-03 davidianus)，俗称娃娃鱼，技有限公司。 大鲵(Megalobatrchus 属两栖纲、有尾目、隐鳃鲵科，是我国珍贵稀有的大 1．2大鲵发病情况及剖检特征 型两栖动物，有很高的经济价值和学术研究价值，被 调查大鲵的发病情况，记录大鲵病变特征。 国家列为Ⅱ类重点保护动物…。自从1978年大鲵人1．3病原菌的分离 工繁殖取得成功以来，我国大鲵人工养殖业发展较为 采用无菌操作取患病大鲵的肝脏、脾脏、肺脏、 迅速，已成为水产养殖中的优良品种之一。然而随着 肾脏等病灶组织，接种在血琼脂平板和普通琼脂平板 大鲵人工养殖规模的扩大，养殖密度的增大，以及病 上，于28℃恒温培养24h后，挑取优势单菌落划线 原体耐药性的逐年增加。近年来不断发生各种疾病， 纯化，并接种于普通琼脂培养基斜面上，于4℃冰箱 尤其是症状复杂的传染病，使大批大鲵发病死亡，造 保存。 成养殖户惨重的经济损失，严重阻碍了大鲵人工养殖 1．4人工回归感染试验 的健康发展。因此，关于大鲵致病菌的分离鉴定及其 CFU／ 将分离得到的菌悬液浓度稀释为2．0x108 药敏特性等基础理论研究对大鲵病害的有效防治显得 mL，然后分别对健康的鳖进行腿部基部注射感染， 尤为重要。2009年4月713，贵州省贵定县某养殖 每尾注射剂量为0．5mL。以注射等量无菌生理盐水 场感染了严重的以“大鲵四肢腐烂、体表多处溃烂、 的健康试验鳖作为对照，每注射组试验鳖各8尾。连 以及多个内脏器官出现充血、出血”为主要病症的 续7d观察并记录试验鳖的病症及死亡数目，同时对 疫病。本试验从自然发病的大鲵体内分离得到1株致 人工回归感染发病濒死的鳖进行病原菌再分离，观察 病菌，经人工回归感染试验证实该菌株具有较强致病 再分离的菌株与原分离菌株在形态与理化特性等方面 力；采用生理生化鉴定和16SrRNA基因序列分析对是否一致。 该菌株进行了鉴定，并进一步研究了其药敏特性，以 1．5病原菌的鉴定 期丰富大鲵病原生物学特性，为大鲵细菌性病害的有 1．5．1形态观察 效防治提供科学依据。 取纯培养菌移接于普通营养琼脂斜面，置28℃ 培养18。24h后，制备成涂片标本，经革兰氏染色 1材料与方法 镜检细菌形态。 1．1材料