促红细胞生成素对低氧状态下神经干细胞增殖、分化的影响.pdfVIP

4 JBengbuMedCoil，January2010，Vo1．35，No．_1 [文章编号]1000—2200(2010))【l004—04 · 基础 医学 · 促红细胞生成素对低氧状态下神经干细胞增殖 、分化的影响 赵保明，赵 莉，耿慧慧 [摘要]目的：探讨促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)对低氧状态下神经 1二细胞 (neuralstemcell，NSC)增殖、分化的影响。 方法：采用 10％低氧环境中无J仉清悬浮培养胚鼠腑源性NSC；加入 EPO，观察和计数NSC克隆形成率，MITI’法检测 NSC的生 长情况；胎牛血清诱导细胞分化，神经元特异性烯醇化酶 (neuron—specificenolase，NSE)和神经胶质原纤维酸性蛋 白(gtia fibrillaryacidicprotein，GFAP)免疫荧光染色检测 NSC的分化情况。结栗：培养的细胞经鉴定呈Nestin阳性，分化后部分细胞 呈NSE阳性 ，部分细胞呈GFAP阳 ：。常氧和低氧组 NSC的克隆形成率分别为 (32．26±3．26)％和 (48．93±4．34)％。低 氧+EPO组NSC的克隆形成率比低氧组增JJ口r17．26％；分化后 ，NSE阳性细胞数 目增多。结论：低氧可促进NSC增殖，促进 其向神经元方向分化；EPO能进一步促进 NSC增殖及向神经元方向分化。 [关键词]神经干细胞；低氧；促红细胞生成素；增殖；分化 [中国图书资料分类法分类号]R338．1 [文献标识码]A t EffectsoferVthrOpOietin ontheproliferation and differentiationofneuralstem cellsinhypoxia ZHAOBao—tiling，ZHAO Li，GENG Hui—hui (DepartmentofHumanAnatomy，BengbuMedicalCollege，BengbuAnhui233030，China) [Abstract]Objective：Toexploretheinfluenceoferythropoietin(EPO)ontheproliferationanddifferentiationofneuralstemcells (NSCs)inhypoxia．Methods：TheNSCswel’eputintotheincubatorwithof10％02，andEPOwasaddedintotheculturesduringthe proliferationanddifferentiationperiodofNSCs．TheproliferationofNSCswasevaluatedbyM町 methodandclonecalculation．Afterhte differentiationofNSCswith10％ fetalbmineserum(FBS)，thediflbrentiationratioofNSCsintoneuronsandgliacellswasdetectedby immunocytoehemistryforneuron～specificenolase(NSE)andgliafibrillmyacidicprotein(GFAP)．Results．Thecellsculturedwere nestinpositive；afterdifferentiation，partofthem wereNSE positiveandotherswereGFAP positive．ThecloningefficiencyofNSCsin normoxiaandhypoxiagroupwas(32．26±3．26)％ and(48．93±4．34)％respectively．ThecloningefficiencyintheconditionofEPO withhypoxiaincreased by17．26％ comparedwith thatotthehypoxi