寒凝血瘀证小鼠动物模型的建立及评价.pdfVIP

中国中医药科技2010年 1月第 17卷第 1期 Jan．2010Vo1．17No．1 · 基础研究 · 寒凝血瘀证小 鼠动物模型的建立及评价 周华妙 郭 勇 (浙‘江中医药大学 ·杭州 310053 浙江中医药大学第一临床医学院 ·杭州310006) 摘 要 目的：探索寒凝血瘀证动物模型的制作方法。方法：将 BALB／C雌性小鼠随机分为 2组，即空 白 对照组、寒凝血瘀组，采用肾上腺素皮下注射加冰浴法进行造模，对造模前后小鼠进行症状和体征的评 价，测定耳温及血液流变学变化等。结果：模型组小鼠出现寒战、蜷缩少动、爪尾部紫癜等症状 ，耳温下 降，全血黏度增高，与空白对照组比较有显著性差异。结论：该方法建立的寒凝血瘀证小鼠模型符合中医 证侯特点，具有一定的理论和实践意义。 主题词 模型，动物，方法 寒凝血瘀证 ，j、鼠 血瘀证是临床上各种疾病的常见证侯之一，近年来国内 国医学科学院上海实验动物中心提供。试剂及药品：生理盐 外许多学者研究有关血瘀证动物模型的制作，运用各种现代 水：由常州康普药业有限公司生产；0．1％盐酸肾上腺素：由 化手段，采用不同途径、不同思路研制出了多种血瘀证模型， 天津金耀氨基酸有限公司生产，批号 ：主要仪 取得了可喜成就，而寒凝血瘀证作为血瘀证的一个亚型 ，其 器：红外耳式体温计 ：由泰尔茂医疗产品(杭州)有限公司生 模型研究一直受到人们的关注。目前该模型的制作方法… 产。自动血流变测试仪：北京众驰伟业科技发展有限公司。 大致有局部冻伤法、全身冷冻法、风寒环境法、冰水浸泡法、 2 实验方法 冰水浸泡加药物法、冷刺激法、寒凉中药法等方法 ]。而在 2．1 造模 每天定点小鼠皮下注射 0．1％肾上腺素 0．08ml／ 上述造模过程中存在许多随意性，如造模时间短，部分更是 k(用生理盐水稀释至 0．2m1)，分 2次注射，第一次注射后 1 急性造模，造模因素单一或局限，模型评价侧重于生化检查 、 小时，进行冰浴 (4～6~C)4分钟，再过 1小时后第 2次注射 ， 血液流变学检查等不足，目前尚没有比较成熟且公认的造模 连续 2周 ，后2周造模隔天进行。 方法。本实验以中医理论为指导，以中医 “寒邪致瘀”之病因 2．2 观察指标及测定 病机 ，结合血瘀的现代医学的病理生理改变，采用肾上腺素 2．2．1 症状和体征量化评分表 皮下注射加冰浴的方法建立寒凝血瘀证小鼠模型，为该种模 依据 《中药新药临床研究指导原则》(2Oo2年)、《中医临 型的制作提供一种方法，以用于实验研究。 床诊疗术语-证侯部分》(1997年)及 《实验动物学》(陈主初 1 实验材料 动物：健康雌性8周龄 BALB／C小鼠20只，中 吴端生主编)制定，见表 1。 表 1 ’ 寒凝血瘀证小 鼠症状和体征量化评分表 注：以上评分表中，每项症状和体征轻度为 1分 ，中度为2分 ，重度为 3分，其中总分 1～7分为轻度寒凝血瘀征表现，8～14分为中度寒凝 血瘀证表现，15～21分为重度寒凝血瘀证表现 。未出现上述症状和体征者计为0分 。 2．2．2 耳温 红外耳式体温计测定。 液流变仪测定。 2．2．3 全血黏度 于第 28天，处死小 鼠，取血采用 自动血 2．3 统计学处理 采用SPSS13．0软件包统计，数据均用均 数 ±标准差 (±s)表示 ，组问差异的显著性采用 t检验。 3 结果 △通讯作者 · 2 · 中国中医药科技 2010年 1月第 17卷第 1期 Jan．2010Vo1．17No．1 3．1 小鼠不 同时段症状和体征量化评分 见表 2。 等 6【j。 表 2 寒凝血瘀证小 鼠症状、