胎盘免疫调节因子对HepG2．2．15细胞毒性及HBV DNA分泌作用的影响.pdfVIP

山东医药2010年第 50卷第3期 胎盘免疫调节 因子对 HepG2．2．15细胞 毒性及 HBVDNA分泌作用的影响 覃柳燕 ，张学荣h，何 敏 ，韦秋兰 ，张钦乐 ，赖允丽 (1广西医科大学蛇毒研究所，南宁530021；2广西医科大学科学实验中心) 摘要：目的 观察胎盘免疫调节因子(PF)在体外的抗乙肝病毒 (HBV)作用及安全性。方法 将质量浓度分 别为0．032—20．000mg／ml的PF作用于体外培养的人肝癌细胞系HepG2．2．15细胞 ，通过 M1rr比色法观察细胞 增殖抑制率及半数毒性质量浓度(TC∞)，以荧光定量PCR法检测HBVDNA水平(以拉米夫定为阳性对照组)。结 果 PF处理后细胞增殖抑制率为0．75％ ～58．21％且呈浓度依赖性，作用72h后Tc 为 13．61ms／．a；PF作用 72h和 144h后 ，细胞上清液中HBVDNA拷贝量显著降低，与阳性对照组水平相似。结论 PF在体外有显著抗 HBV作用 ，且细胞毒性较小。 关键词：胎盘免疫调节因子；HepG2．2．15细胞；乙型肝炎病毒 中图分类号：R512．6 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2010)03-0016-02 EffectofplacentaimmunoregulatingfactoronthecytotoxicityandHBV DNA secretionin theHepG2．2．15cells QINLiu—yan，ZHANGXue—rong，HEMin，WEIQiu—lan，ZHANGQin—le， ，Yun—li (1InstituteofSnake13enom，GuangxiMedical 瑙 ，Nanning530021，P．R．China) Abstract：Objective Toobservetheanti—hepatitisBvirus(HBV)effectsofplacentaimmunoregulatingfactor(PF)in vitro．M ethods ThehumanhepatomacelllineHepG2．2．15cellsculturedinvitrowereexposedtoPF atthemasscon— centrafionsof 0．032to20．000ms／mlrespectively．Th einhibitionrateandhalfoftheinhibitionrateoftoxicconcentration (TC5o)ofcellswel-eevaluatedbyMehtylhtiazolyltetrazolium(MTT)assay．TheHBVDNAlevelwasdetectdebyFluores— cencequnatitative—PeR(withLamivudine．asapositivecontrolgroup)．Results Thecellinhibitionratewas0．75％ to 58．21％ inconcentration—dependentmanneraftertreatde byPF，TC5072hoursafterthetreatmentwas 13．61me,／m1．Seven— t)，一twoand144hoursaftertreatde byPF，thecopiesofHBVDNAinthesupematnatofthecellsdecreasde significantly，and thelevelWaSsimilartothepositivecontrolgroup．Conclusion PF hassignificantnati·HBV effectinvitro，andapperaes lesscytoto】i【city． Keywords：placentaimmunoregulatingfactor；HepC2．2．15cell；hepatitisBvirus 目前临床治疗 HBV感染的西药主要为拉米夫 基，胎牛血清，HBVDNA荧光定量 PeR试剂盒，实 定等核苷类药物和干扰素，治疗效果均不理想…。 时荧光定量PeR仪，CO培养箱，培养瓶，96孔板。 近年研究显示，胎盘免疫调节因子 (PF)对病毒性疾