胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展.pdfVIP

广东畜牧兽医科技 2010年(第35卷)第 期 专题综述 ·3 · 胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展 熊 浩，崔 雯 d历州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州 225009) 摘 要：胚胎干细胞 (EmbryoniCStemcel1s，ES细胞)是从附植前胚胎的内细胞团 (IcM)或附植后胎 儿的原始生殖细胞 (PGCs)经体外抑制分化培养、分离和克隆得到的具有发育全能性的细胞。ES细胞体外 诱导分化的研究自从 20世纪90年代开始到现在，一直是生命科学和医药工程领域的研究热点，并且近年 来这方面的研究也取得了一些突破性的进展。本文简述了胚胎干细胞的诱导原理、方法和定向分化的一些 细胞种类以及 目前研究存在的问题和困难。 关键词：胚胎干细胞；诱导；分化 中图分类号：S814．8 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—8567(2010)O1—0003—03 胚胎干细胞 (Embryonicstemcells，ES细胞) 果取决于细胞在基因表达上的时空差异 。这种基 具有高度的分化潜能，1981年 Evans和 KauffmanClj 因表达差异除由细胞内在发育程序决定外 ，还受 最早报道了由延迟着床小鼠囊胚成功分离到ES细 细胞外环境影响和调控，且有时这种外部控制条 胞。由于来源于 ES细胞的各种细胞可能应用于临 件或环境对形成特定细胞有着决定性作用。ES细 床，为器官移植、损伤器官的修复提供原材料，所 胞体外定向诱导分化的原理，就是选择适当的诱 以人们除了研究ES细胞的分离、克隆和培养之 导剂和诱导模式，通过诱导物与细胞表面受体结 外，更重要的是研究其在体外诱导分化的机制、条 合或使细胞发生轻度可逆性损伤等 ，使被诱导细 件 以及由其分化的细胞种类 。ES细胞在体外的培 胞按预定的细胞类型方向分化 [2]，然后将这些定 养过程 中，能够在有饲养层细胞或者分化抑制因 向分化的细胞进行分离和培养传代，从而得到人 子 (DIA)，白血病抑制因子 (LIF)等存在的条件下 们所需要的细胞类型。 维持其未分化状态，保持发育全能性，可以无限增 2 体外诱导 ES细胞的方法 值，但一旦除去饲养层细胞，除去这些抑制分化 因 体外诱导Es细胞的常用方法是将ES细胞进 子，或者添加一些诱导分化因子 (如维甲酸 RA、神 行悬浮培养或悬滴培养，使其形成类胚体 (Embry— 经生长因子NGF)等，就会 向各类可能的细胞发生 oidBodies，EBs)，该结构的分化过程与体 内胚胎 定向分化。在 ES细胞的诱导过程中，不同的诱导 的早期发育过程相似。首先将EBs消化成单细胞， 方式所得到的分化细胞的种类和数量不同；相同 然后再贴壁培养，并于不同的培养阶段添加不同 的诱导方式，不同的培养状态其分化行为也不相 种类和不同浓度的化学物质、条件培养基或细胞 同。 目前，已从ES细胞诱导出神经细胞、心肌细 因子等诱导条件，直接促进 ES细胞定向分化为某 胞、血细胞、血管细胞 、脂肪细胞、肝细胞、骨细胞 种特殊类型的细胞；或通过改变培养条件对某些 和胰岛素分泌细胞等。 类型的细胞分化起抑制作用，从而高效诱导 目的 1 体外诱导 ES细胞的原理 细胞 的分化[3]。改变细胞的培养条件使 ES细胞进 在体胚胎分化过程中，组织发生和身体构造 行定向分化的基本策略有三种：一是 向培养基 中 的形成具有时空顺序性和相互诱导性j在个体发