紫丁香蘑原基诱导合成培养基初探.pdfVIP

亿 亏 与生 物 Z程 2010，VoI．27No．1 国 Chemistry Bioengineering 紫丁香蘑原基诱导合成培养基初探 姚志伟 。袁阳波 ，高君伟 (武汉生物工程学院生物工程 系，湖北 武汉 430415) 摘 要：通过正交实验筛选了一种用于紫丁香蘑原基诱导的合成培养基。合成培养基由复合碳源(木糖+糊精)、复 合氨基酸氮源、无机盐、MS培养基中的饭量元素及铁盐、生长因子、出菇刺激物等6部分构成，以珍珠岩为支持物。优化 后培养基中含有 5g·L 木糖、25g·Lf1糊精、0．1g·L 乙酸钠。在此培养基上，紫丁香蘑茵丝经 24℃无光培养 3O d、再经 16℃弱光刺激 15d后 可产 生 83个原基 。 关键词 ：紫丁香蘑 ；合成培养基 ；子实体 ；原基；诱导 中图分类号 ：Q93—335 文献标识码 ：A 文章编号 ：l672—5425(2010)01—0059—04 许多野生食用菌，尤其是草腐菌和菌根菌 ，都只能 单 ／双糖)，诱导碳源(25g·L 多糖)。(2)氮源 (2g· 培养其菌丝体，却不能成功地栽培出子实体 。因此，对 L 复合氨基酸)，配制为贮备液使用 ，每 1000mL培养 子实体诱导培养基的研究格外重要。 基添加量 78．7mL，贮备液具体成分：异亮氨酸0．87g， 草腐菌子实体的发生对营养的要求复杂多样，且与 亮氨酸 1．18g，盐酸赖氨酸 1．74g，甲硫氨酸 1．12g，苯 环境因子以及环境微生物的关系密切，目前少数报道的 丙氨酸 1．03g，苏氨酸 1．12g，色氨酸0．43g，盐酸精氨 草腐菌的子实体诱导培养实验，通常是在天然或半合成 酸 3．50g，缬氨酸 0．95g，甘氨酸 3．23g，盐酸组氨酸 培养基上进行的[】]。由于这些培养基的准确成分不定 ， 0．98g，酪氨酸 0．165g，丙氨酸 5．33g，脯氨酸 2．90g， 对草腐食用菌生命活动规律的研究造成了一定的限制。 丝氨酸 2．90g，N一乙酰一L，半胱氨酸0．22g，谷氨酸 2．28 在诸多培养基中，合成培养基 因其成分明确，成为培养 g，蒸馏水 1000mL。(3)无机盐 (mg ·L )：KH2PO4 基设计初期最好的生理研究和环境因子筛选平台。此 3000，MgSO4·7H2O 1500，CaC12·2H2O40，需将氯化 外 ，以无机支持物吸附液体培养基是诱导子实体发生的 钙和硫酸镁分开灭菌后无菌混合。(4)微量元素及铁 较好方法_2]。因此 ，作者利用珍珠岩吸附液体合成培养 盐：为植物组织培养基 (MS培养基)中MS]I微量元素、 基的方法 ，对紫丁香蘑原基诱导合成培养基进行了成分 MS[II铁盐，MSlI贮备液 (mg·L_1)：K10．83，H BOa 优化 ，以筛选出一种适于诱导其子实体原基发生的合成 6．2，MnSO4·4H2O22．3，ZnS04·7H2O8．6，Na2MoO4 培养基 ，为进一步研究紫丁香蘑 的生理学问题、探讨其 ·2H2O 0．25，CuSO4 ·5H2O 0．025，CoCl~ ·6H2O 子实体原基发生机理提供实验平台。 0．025，额外添加 ：NiC12·6H2O0．08，SncI2·2H2O 0．038；MSIII贮备液 (mg·L )：Na2EDTA 37．3，FeSO4 1 实验 · 7H2O27．8]。(5)生 长因子液 (nag ·L-1)：i-肌 醇 I．1 菌种 100，盐酸硫