酶联免疫酶标法在临床中的应用.pdfVIP

医 疗 论 坛 中 国 民 族 民 间 医 药 MedicialTreatmentForum Chinesejournalofethnomedieineandethnopharmacy ·85 · 酶联免疫酶标法在临床 中的应用 董韶伟 曹桂琴 赵丹华 河南省平顶山市平煤医疗集团一矿医院，河南 平顶山 467000 【摘 要】：ELLSA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病，寄生虫病及非传染病等各方面 的免疫诊断，也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定。ELLSA酶标法应用范围很广，而且正在不断扩大，原则上ELLSA也可应用 于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。在实际应用方面可作疾病的临床诊断，疾病监察，疾病普查等。 【关键词】：抗体；免疫；ELLSA；酶标法；应用 【中图分类号】R443 【文献标识码】A 【文章编号】1007—8517 2【010)叭-0085一O1 1 前言 别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本 的加入 近几年来，免疫学分析方法发展很快 ，特别是在使用 和酶标抗体的加入两步并成一步。 标记抗原和抗体的分析技术以后，使原来许多经典的分析 捕获法原理 ：将抗人 Igm抗体连接在固相载体上 ，形 方法在敏感性和特异性方面都不能相比，由于酶的高效生 成固相抗人 Igm，洗涤、加入稀释的血清标本 ，保温反应 物催化作用，一个酶分子在数分钟可以催化几百个低分子 后 ，血清中的Igm抗体被固相抗体捕获，洗涤除去其他免 发生反应，产生了放大作用，使得原来及微乎其微的抗原、 疫球蛋白和血清中的杂质成分 ，加人特异性抗原试剂 ，这 抗体在数分钟就可以识别 出来 ，这种技术被称为酶联免疫 只与固相上的特异性 Igm结合 ，洗涤加入针对特异性的酶 吸附试验法 (ELLSA法)。 标抗体 ，使之与结合在固相上的抗原反应结合，加底物显 ELLSA法是免疫诊断中的一项新技术 ，现 已成功地应 色。如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性 Igm抗体 用于多种病原微生物所引起的传染病 ，寄生虫病及非传染 存在 ，是阳性反应。 病等方面的免疫诊断，也已应用于大分子抗原和小分子抗 3 判断方法 原的定量测定。根据三年来的使用结果分析，认为ELLSA “+”或 “一”所有超过规定 的OD值的标本均属 阳 酶标法具有灵敏特异，简单、快速 、稳定及易于 自动化操 性，此规定OD值是根据事先测定的大量阴性标本所取得 作等特点，不仅适用临床标本 的检查，而且 由于一天之 内 的，此规定是 阴性标本的上 限，或者以一组阴性标本 OD 可以检查几百，甚至上千万标本。因此，也适合于血清流 平均值加2—3个标准作为阳性阈值。 行病学调查，本法逼近可以用来检测抗体，而且也可应用 直接以OD值来表示如0．4、0．7、1．2，OD值越大， 于测定体液中的循环抗原，所 以也是一种早诊断的方法。 阳性反应越强但此数值实在固定实验室条件下，得到的结 我院从2006年元月至 2009年元月，用ELLSA酶标法检测 果 ，而且每次实验都要有参考标本作对照。 传染病总人数为7890人，乙型肝炎患者为758人 ，甲肝患 以终点滴度表示，将标本作连续稀释，最高稀释度能 者为 10人，丙肝患者为 35人，梅毒患者 19人。用 ELLSA 出现阳性反应者 (即OD值仍大于阳性阈值，即为该标本 酶标法在生物医学领域的应用范围日益扩大。 的滴度)。以 “比值”表示 ，求出被检标本的 OD值的比 2 测定抗体的种类方法原理 值。例如 ：为阴性标本的2倍或3倍，即为阳性比值小于 测定抗原体有四