胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用.pdfVIP

36 安徽农学通报 ，AnhuiAgri．Sci．Bul1．2010，16(02) 胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用 杨雪林 张福官 杨卫华 周海南。 沈政会 (t江苏省吴江市震泽动物防疫站，江苏吴江2l5231；江苏省吴江市平望动物防疫站；江苏省吴江市横扇动物防疫站) 摘 要：胶体金快速诊断技术不需要特殊设备，结果判断直观，越来越受到人们的重视，在生物医学领域特别是检 验中得到广泛的应用。 关键词：胶体金；快速诊断；免疫层析 中图分类号s851．32 文献标识码B 文章编号1007—7731(2010)02—036—002 以膜为固相载体的胶体金快速诊断技术是20世纪80年 电的氨基反应；其次蛋 白质通过疏水作用吸附于金颗粒表 代在酶联免疫吸附试验 、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、 面；配位键是通过蛋白质中半胱氨酸的硫残基与金颗粒的 胶体金免疫技术和新材料技术基础上发展起来的一项新 电子层发生配位结合。 型体外诊断技术lJI。由于其快速 、便捷 、不需特殊设备、结果 在特定条件下，使胶体金溶液与某种蛋白质溶液相混 判断直观 ，近年来越来越受到人们的重视，其技术发展迅 合 ，胶体金颗粒便可把该蛋 白质分子吸附在其表面上，形 速，在生物医学领域特别是医学检验中得到了广泛应用。 成一种包被了该种蛋白质的示踪物或探针。若包被 的蛋 白 目前在兽医临床诊断中也研制了许多种检测试剂盒 ，其基 质为抗体 ，则胶体金颗粒便是一个表面布满了抗体的球形 本原理是：以微孑L膜为固相载体 ，包被已知抗原或抗体，加 粒子。用此胶体金粒子可以检测其包被抗体对应的抗原； 入待测样本后 ，经微孔膜的渗滤作用或毛细管虹吸作用使 反之，若以抗原包被胶体金颗粒 ，则可用其检测该抗原对 标本中的抗体或抗原与膜上包被的抗原或抗体结合，再通 应的抗体。上述两类包被胶体金称之为免疫胶体金。 过胶体金标记物与之反应形成红色的可见结果。目前最为 1．3胶体金快速诊断试纸 广泛使用的有2种特定的模式 ：穿流形式(Flowthrough)， 胶体金快速诊断试纸通常包括加样区、反应区和吸附 又称为斑点免疫金渗滤试验(Dotimmuno—goldfiltration 区三部分组成。 assay，DIGFA)或免疫渗滤试验(Immunofiltrationassay，IFA 1．3．1加样区 含有免疫胶体金颗粒，通常由玻璃纤维将免 )；另一种为侧向横流形式(Lateralflow)，又称为胶体金免 疫胶体金颗粒吸附在该区。 疫层析试验(GoldImmunochromatographicassay，GICA)2{J。 1．3．2 反应区 喷涂或点加两条反应线 ，一条为检测线，一 本文将重点介绍胶体免疫层析试验。 条为质控线。检测线用以检测此处的抗体(或抗原 )物质与 1胶体金快速诊断试纸的诊断原理 免疫胶体金颗粒的包被抗原(抗体或抗体携带的抗原)的 I．I胶体金 反应性 ；质控线则用以检测免疫胶体金颗粒上的包被蛋白 胶体金(Colloidalgold)是由金离子还原而成的许多单 质的活性及程度，反应区的材料主要是硝酸纤维素膜。 个金颗粒组成的悬浮液，胶体金颗粒是由一个基础的晶核 1．3．3 吸附区 由较厚的滤纸或类似的吸水材料制成 ，将由 及包围在外的双离子层构成 ，紧连在金核表面的是内层负 加样区经反应 区层析上来 的剩余免疫胶体金颗粒等吸附 离子(AuC1一)，外层离子H则分散在胶体间溶液。金颗粒表 于其中，该区提供层析的动力。免疫胶体金颗粒 由加样区 面所包围的阴性电荷层，叫做zeta电位。可以使胶体金颗粒 释放后 ，经反应区，部分继续到吸附该区，完成层析。 之间相