调节性DC分泌exosomes对急性GVHD抑制作用的初步研究.pdfVIP

临床输血与检验 2010年 1月第 12卷第 1期 调节性DC分泌exosomes对急性GVHD抑制作用 初步研究 任亚娜 杨洁 刘女羲 谢如锋 高跞 杨懿铭 范华骅 【摘要】 目的 探讨调节性树突状细胞 (rDC)分泌exosomes在移植物抗宿主病 (GVHD)模型中的免疫抑制作用 。方 法 用TGF一81和IL一1O诱导从C57BL／6小 鼠骨髓来源产生rDC，负载DBA／2小 鼠来源的抗原 ，应用流式检测rDC表型 。采 用超速离心结合膜超滤 的方法分离纯化rDC分泌的exosomes，电镜检测exosomes形态 。在 以DBA／2小 鼠为受 鼠，C57BL／ 6小 鼠为供 鼠的急性GVHD模型 中，尾静脉注射rDC分泌的exosomes，观察受 鼠急性GVHD症状的改变。结果 rDC的I— A／I—E(MHC一Ⅱ类分子)，共刺激分子CD80、CD86表达量均 比未成熟树突状细胞 (imDC)低 ，其分泌的exosomes为直径小 于 100nm 的小囊泡。在小 鼠急性 GVHD模型 中，同种异基 因骨髓移植 0、7、14d静脉注射rDex(15 g／只)治疗 的小 鼠， GVHD表现较对照组症状轻 ，生存期较长 ，两组相 比差异有统计学意义 (Po．05)；且较静脉注射rDex30 g／只的治疗效 果好 。结论 rDC分泌的exosomes能够提高GVHD小 鼠生存率 ，可应用于治疗急性GVHD 【关键词】 调节性DC Exosomes 移植物抗宿主病 免疫耐受 【中图分类号】 R392．4 R446．6 【文献标识码】 A 【文章编号1 1671-2587(2010)01-0011-05 ThePrimaryStudyontheAcuteGVHD SuppressionbyExosomesDerivedfrom RegulatoryDe REN Ya—na，YANG Jie· L， Yan．eta1．Blood EngineeringLaboratory，ShanghaiBloodCenter，Shanghai200051 [Abstract] Objective Toanalyzetheimmunesuppressioneffectofexosomesderivedfrom regulatorydendriticceils (rDC)ingraft—versus—hostdisease(GVHD)mode1．Methods rDCoriginatedfrom bonemarrowofC57BL／6micewerein— ducedbytreatingwithTGF—B1andIL一10，andloadedwithantigenfrom DBA／2mice．Andthephenotypesofthem were assayedby flow cytometry．Thenexosomessecretedfrom rDCwereisolatedbyultracentrifugationandultrafiltration，and theprofilewasidentifiedbyelectronmicroscope(EM)．RecipientsDBA／2wereinjectedwithexosomesderivedfromrDCof donorC57BL／6miceviatailveininacuteGVHDmode1．Thenthechangesoftherecipientswereobserved．Results rDC expressedlessI-A／I—E (MHC—lImolecule)，co—stimulatorymoleculesCD80，CD86thanimmatureDC (iDC)．Exosomes derivedfrom rDC weresmallvesicleswithanaveragediameteroflessthan 100nm．InthemousemodelofacuteGVHD ， GVHDsymptomsofthemicetreatedwithintravenousrDex (15vg／mouse)afterallogeneicbonemarrowtransplantation 0，7，14一day，werelessthanthecontrolgroup．Them iceofthetreatmentgro