复方冬菊癌化学预防作用实验与研究.pdf

复方冬菊癌化学预防作用的实验研究 摘要 要减少癌症对人类的危害，最重要的措施之一就是用预防减少癌症 的发生率，而癌化学预防又是最有效的措施之一。癌化学预防药物的开 发是癌化学预防研究领域最主要的环节之一。国内外相关研究机构都已 建立了一系列成熟的癌化学预防药物筛选实验模型，筛选出了一大批具 有广阔应用前景的化合物，其中有些已经进入了临床实验阶段。已有不 少研究表明，一些中草药的活性成分具有抗致突变、抗促癌及抗化学致 癌的作用，有些还对癌细胞有分化诱导作用，因而中药有可能在癌预防 方面做出巨大贡献。中药在我国分布广泛，价格较低，所以运用癌化学 预防药物筛选方法定能在中医药宝库中挖掘出理想的药物。 目的： 本研究将在临床初步发现复方冬菊具有预防口腔白斑癌变功效的基 础上，通过抗小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成实验、鼠耳肿胀抑制实验、 小鼠皮肤乳头状瘤生成抑制实验、4．NQO诱导大鼠舌白斑癌变模型实验、 列癌化学预防药物的体内外筛选实验，验证复方冬菊的癌化学预防作用， 为开发具有自主知识产权的癌化学预防新药提供实验依据。 方法： 1．抗小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成实验：ICR雄性小鼠40只，随机 分成正常对照组、模型组、复方冬菊给药组和阳性药物(增生平)对 照组。将复方冬菊、增生平预先灌胃5天，并于第5天复方冬菊给药 组、阳性药物对照组与模型组动物腹腔注射环磷酰胺(CTX)。24h 后处死小鼠，取骨髓，制成骨髓涂片，染色，油镜下计数1000个骨 髓嗜多染红细胞。比较复方冬菊给药组、阳性药物对照组与模型组嗜 多染红细胞中微核率的差异，计算微核抑制率，评价药物对CTX诱 发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成的抑制作用。 2．鼠耳肿胀抑制实验：ICR雄性小鼠30只，随机分成模型组、复方冬 、 菊给药组和阳性药物(增生平)对照组。将复方冬菊、增生平预先灌 胃6天，末次给药后将致炎剂涂抹于实验小鼠一侧耳廓，5h后处死 动物，取两侧耳片，称重，计算差值。比较复方冬菊给药组、阳性药 物对照组与模型组小鼠耳廓肿胀程度，评价药物对致炎剂诱发鼠耳肿 胀的抑制作用。 3．小鼠皮肤乳头状瘤生成抑制实验：ICR雄性小鼠60只，随机分成模 型组、复方冬菊给药组和阳性药物(增生平)对照组。小鼠背部脱毛， 涂抹致癌剂至实验结束。12周后清点小鼠背部乳头状瘤数，以各组 荷瘤动物占该组存活动物数的百分比值计算肿瘤发生率，用各组小鼠 乳头瘤发生总数和该组存活小鼠数计算每鼠平均荷瘤数。比较复方冬 菊给药组、阳性药物对照组和模型组肿瘤发生隋况，评价药物对肿瘤 生长的抑制作用。 空白组、模型组、复方冬菊给药组和阳性药物(增生平)对照组。制 作4-NQO诱导大鼠舌白斑模型，30周后取各组舌背标本进行分级组 织病理诊断。比较复方冬菊给药组、阳性药物对照组和模型组大鼠舌 背肿瘤发生情况，评价药物对4-NQO诱导大鼠舌背白斑癌变的抑制 作用。 5．肿瘤细胞体外抑制实验：采用MTT法观察复方冬菊对口腔鳞癌 CAL．27、TCA81 13肿瘤细胞株体外生长抑制作用。 结果： 1．注射CTX后，模型组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核大量增加，而复方 冬菊给药组和阳性药物对照组小鼠的微核率均明显下降，复方冬菊给 药组和模型组之间差异有统计学意义(PO．05)。 2。涂药侧鼠耳(左侧)充血肿胀，耳片厚实；健侧鼠耳(右侧)耳片菲 薄，血管清晰。复方冬菊给药组和阳性药物对照组与模型组之间小鼠 耳片重量差值有显著性差异(PO．05)。 3．实验第6周，模型组小鼠背部陆续发现乳头状瘤，此后肿瘤诱发率和 每鼠荷瘤数逐渐增加。复方冬菊给药组和阳性药物对照组每鼠平均荷 瘤数较模型组下降，分别为o．25个和0．5个，抑瘤率分别达到82．1％ 和64．3％。 4．复方冬菊给药组和阳性药物对照组大鼠舌背白斑的癌变率明显低于 模型组(Po．05)。 5．复方冬菊的DMSO溶解提取混悬液对CAL．27和Tca8113两株口腔鳞 癌肿瘤细胞株的体外生长均可以产生抑制作用。 结论： 综合5个癌化学药物筛选实验结果，显示复方冬菊具有一定的癌化 学预防作用，具有良好的开发前景，其防癌、抗癌功能是