银杏内酯B对胚胎大鼠中脑神经细胞保护作用及机制研究.pdf

银杏内酯B对胚胎大鼠中脑神经细胞保护作用及其机制的研究 中文提要 中文提要 lide 题目：银杏内酯B(giIll(goB，OB)对胚胎大鼠中脑神经细胞保护作用及其 机制的研究。 目的：通过银杏内酯B对体外培养胚胎大鼠中脑神经细胞生长发育及其对中脑 神经细胞损伤的保护作用机制的研究，为临床应用GB治疗中脑神经损伤相关疾病 提供理论依据。 方法：通过14d的Wistar胚胎大鼠中脑神经细胞的体外原代培养以及海人藻 酸(kainicacid，KA)干预造成胚胎大鼠中脑神经细胞损伤模型；用NGF作阳性药 物对比，采用台盼蓝测定细胞活力；MTT方法检测神经细胞存活率；SP法免疫组 化染色测定中脑神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)表达；黄嘌呤氧化酶法测定超氧 测定中脑神经细胞相对蛋白质含量；及Leica采集图像进行细胞形态学观察，初步 探讨GB促进中脑神经细胞生长、分化和保护作用及其机制。 结果：1、GB对中脑神经细胞生长的影响 1．1中脑神经细胞存活率：中脑神经细胞经1d、2d、3d、4d培养后，NGF组， 组，GB组之间无显著性差异；KA组在2d开始与对照组相比睨显下降(氏0．05)， NGF和GB可逆转KA降低存活率的作用，且随着GB剂量的增加，逆转作用增 强(氏0．05)。 抑制作用(86．5％、82．1％，与KA组比P0．01)。 2、GB对中脑神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)表达的影响：各组中脑神经 细胞培养均至10d，观察以下指标： 2．1NSE阳性细胞数：，NGF组和GB组阳性细胞数明显大于对照组(氏0．01)； I 中文提要 银杏内酯B对胚胎大鼠中脑神经细胞保护作用及其机制的研究 KA组阳性细胞数明显减少，与对照组相比P0．01，有明显的抑制倾向。GB+KA 组和NGF+KA组阳性细胞数明显大于KA组CP0．01)。 2．2 1 NSE阳性细胞胞体平均面积：NGF组为1207．7“m2，GB组为167．7¨m2 组阳性细胞面积小于对照组，但大于KA组∽0．01)。 2．3 胞均高于对照组(尸0．01)； 个／细胞，明显高于KA组1．03个／细胞(尸0．01)。 2．4 62．351am大于KA组32．56“m(p0．01)。 3、GB对中脑神经细胞NO、MDA、蛋白质含量及SOD活性的影响 GB(25—100 mg／L)能剂量依赖性地抑制KA引起的神经细胞损伤。GB(50 mg／L) 组在中脑神经细胞培养第10天NO、MDA含量与对照组相当；SOD和蛋白质含 量高于对照组。NGF(50mg／L)+KA(100I-tmol／L)组，GB(50 组。有统计学意义。 结论：GB对中脑神经的生长发育以及对KA引起的损伤有保护作用。该作用 可能与其促进糖代谢过程中NSE酶蛋白的表达相关，也与其可使中脑神经损伤过 ：’b 程中氧自由基平衡恢复有关。本研究结果为GB用于防治中脑损伤提供理论依据。 异性烯醇化酶(NSE)；胚胎大鼠；中脑神经细胞培养 作 者：谭才宏 指导教师：缪丽燕 Il onProtectiveEffectandMechanism Bon Rat MidbrainNeurons Abstract Study ofGinkgolideEmbryonic on