影响山羊幼羔卵泡发育与体外受精效果主要因素与研究.pdf

摘 要 本试验针对如何提高山羊幼羔超数排卵和幼羔卵母细胞体外受精及培养效果开 展了若干方面的研究，以便完善“幼羔超排—活体采卵—体外受精”生产体外胚胎的 技术体系，进而提高体外胚胎生产的效率。 利用外源激素对不同厂家促卵泡素(FSH)诱导羔山羊卵泡发育效果进行了研究， 结果表明：均只获卵数，日本激素组与新西兰激素组差异不显著(66.0 vs 55.75, P0.05) ，日本FSH 组极显著高于国产激素组(66.0 vs 21.0, P0.01) 。均只可用卵数， 日本激素组显著高于国产激素组(31.75 vs 7.75, P0.05) 。比较不同日龄阶段羔山羊激 素诱导卵泡发育效果，结果表明30~50 日龄组的均只获卵数、均只可用卵数(64.67 31.67) 均极显著高于 51~70 日龄组(31.0 11.0) ；但两组的受精率差异不显著 (P0.05) 。间隔一个月，对4 只羔山羊进行重复超排，结果表明，第一次超排均只获 卵数均显著多于第二次(43.50 vs 8.75)，而重复超排卵母细胞受精卵裂率显著高于第一 次(58.25% vs 13.5%) 。 羔山羊卵母细胞体外受精及胚胎发育结果表明，精卵共孵育时间23~26h 组受精 卵裂率为48.33% ，极显著高于18~22h 组的16.0% 和27~30h 组的21.33% (P0.01) 。 研究受精液 pH 对卵母细胞受精卵裂率和桑椹胚发育率的影响，结果表明在 pH=7.5~7.6 的受精液中，卵母细胞卵裂率极显著高于pH=7.7~7.8 组 (51.8% vs 29.8%, P0.01) 。但两组间桑椹胚发育率差异不显著 (33.3% vs 27.3%, P0.05) 。 将50 枚羔羊超排所得体外胚胎移植给 12 只受体，移植40d 后进行B 超妊娠检 测，3 只受体妊娠，妊娠率为25.0% 。2 只受体成功产羔5 只。随即对新生羔羊和供 体及受体羊颈部采血，提取DNA 并经微卫星检测分析，验证所产羔羊与卵母细胞供 体为亲缘关系。 相同体外培养条件下，比较成年山羊离体卵巢卵母细胞与羔山羊卵母细胞体外受 精及发育效果。羔山羊卵母细胞体外受精卵裂率显著低于成年羊卵母细胞(34.9% vs 45.9%, P0.05) ，其桑椹胚发育率(17.24% vs 35.9%, P0.05) 、囊胚发育率(10.7% vs 23.9%, P0.05)也都显著低于成年羊组。 关键词：羔山羊；超数排卵；体外受精；产羔；微卫星检测 Factors on Lamb Goat Superovulation and Embryo in vitro Culture Author: Zhao Hongyuan Speciality: Animal Genetics, Breeding and Reproduction Supervisor: Sang Runzi Abstract The major factors affected the Lamb superovulation-Ovum Pick-up(OPU)and in vitro fertilization (IVF) technique were discussed systematically in this study in order to establish an acceptable production system of Lamb goat super-ovulation-OPU-IVF in our lab. The objective of the present study was to improving the in vitro