H98遗传毒性及生殖毒性实验与研究.pdfVIP

中文摘要 目的：为了保证新药临床应用的安全性，本文从遗传毒性和生殖毒性两方面对 一类新药H98进行了安全性评价。我国的遗传毒性实验组合由微生物回复突变 试验、哺乳动物培养细胞染色体畸变试验和啮齿动物微核试验组成，本文在已 有的致突变研究资料的基础上，选用了我国新药(西药)临床前毒理学评价指 导原则未要求，但近年来国外较多丌展的姐妹染色单体交换(SCE)、胞质分 裂阻滞法微核试验以及hprt基因位点突变分析等遗传毒性试验方法，对受试物 的致突变性进行进一步研究。在致突变研究的同时还应用生殖毒性(I段)实 验方法评价雌性和雄性动物生殖细胞接触H98后对受孕能力、生殖系统及子代 的影响。方法：1．遗传毒性实验方法：姐妹染色单体交换、胞质分裂阻滞法微 核试验及hprt基因位点突变研究均采用CHL细胞体外培养实验。CHL细胞按 2X 105／ml的浓度接种于培养瓶中，在C02恒温箱中培养18h后加入不同浓度 的受试物，常规收获。姐妹染色单体交换实验中加入Brdu对染色单体进行标 记，每个剂量组选择20~25个第二周期分裂相细胞光学显微镜下计数SCE频 率：胞质分裂阻滞法微核试验中加松胞素抑制胞质分裂呈现双核细胞，每个剂 量组计数3000个双核细胞，计算其微核率(‰)；hprt基因位点突变分析中含 6-TG的样本1000个细胞中的突变细胞(双核或多核细胞)数除以不含6一TG 的样本1000个细胞中的突变细胞数，得出hprt基因位点突变频率(10’3)。2． 生殖毒性实验方法：将25—359雄性小鼠按体重随机分为4组，每组20只，按 基纤维素钠溶液：比较各剂量组小鼠生育率及生殖器官的检查结果。雌性小鼠 体重28—359，随机分4组，每组35只，于合笼前2w给药，给药剂量及给药 途径与雄性小鼠相同，分别至妊娠第14d及妊娠第18d解剖，比较各剂量组小 鼠妊娠率、植入数、吸收胎数、活胎数、植入前(后)丢失率以及各组胎鼠畸 形观察结果。结果：1遗传毒性实验结果：H98各剂量组SCEs／cells与对照组 量组双核细胞微核率及hprt突变频率与对照组比较统计学差异不显著 (P)O．05)。2生殖毒性实验结果：(1)H98给药组雄性小鼠生育率与对照组比较 统计学差异不显著(乃O．05)，精子数、活精予率、精子畸形率及睾丸病理检 查均未见明显异常，未见与药物有关的生殖器官的损伤。(2)H98给药组雌性小 娠第18同解剖发现植入后丢失率高于对照组(尺O．05)。(3)H98各剂量组仔鼠 发育良好，骨骼及内脏检查均未见明显异常。结论：1．H98各剂量组SCE频率 未见明显增高，亦未见药物影响的剂量效应关系：2．H98各剂量组双核细胞微 核率(‰)未见明显增高，hprt突变分析结果阴性；3．H98作用于小鼠生殖细 胞后，对受胎能力、生殖系统无明显影响，仅200．Omg／kg组造成死胎数增高 出现胚胎毒性。 关键词：H98遗传毒性SCE微核hprt生殖毒性生育率妊娠率 onthe and ofH98 Study Genotoxieity Reproductivetoxieity Absteract alloverthe have much world attentionthe Objective．Thegovernments paid to examinationofnew andset aseries to oflawsstandardizethe drug up examination ofnew of tovaluethe new them，its of drug．Among greatimportance toxici