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X?；甄2008年第4期
间接ELISA检测奶牛乳
冯万新∽，李宏胜2，罗金印2，
(1．甘肃农业大学。甘肃兰州73007
摘 要： 利用超声波破碎法制备无乳链球茵、
最佳包被浓度及包被条件、血清样品工作浓度、封闭
选和优化，初步建立了间接ELISA法检测奶牛乳房：
测，结果表明该3种抗原反应体系一致，3种抗原最：
方法具有快速、简单、特异性和重复性好等优．点。
关键词： 间接ELISA：奶牛乳房炎多联苗；血：
中图分类号：$852．6 文献标识码：A
多年来．中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所研制
奶牛乳房炎多联苗在全国多个奶牛场应用，对降低奶牛乳
炎发病率具有明显的效果，为了进一步客观的评价该奶牛
房炎多联苗免疫效果．笔者等对奶牛免疫后血清抗体水平
铜tl-／：r吐骥“了珥农加卓音青了阍捧FT lg^北龄Nil帆止驯
仪仪州管福，二产释配
球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌灭活后与铝胶佐剂配合制 制方法参考文献¨’“。
成的多联苗。 1．1．4 实验动物 兰州某奶牛场健康泌乳奶牛24头。
1．12培养基普通牛肉汤，7％羊血琼脂斜面，由本课题 1．2方法
组自制。
1．2．1可溶性抗原的制备与蛋白含量测定将血斜面保存
1．1．3主要仪器与试剂超声波细胞破碎仪(宁波新芝生物
的制苗菌抹无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌分别
000
接种肉汤培养基，37℃培养18—20h，5 r／rain离心，弃上
收稿日期：2008—0l一舯
m。L／L
清，菌泥用生理盐水混悬，洗涤离心3次，最后加0．1 PH
基金项日：国家十一五奶业々项“奶牛丰要疾病综台防控技术研究及
7．6PBS制成细菌悬液，分别采用溶菌酶裂解法和超声波破
开发”(2006BAD04A05一04)
作者简介：冯万新(1981一)．男．在读硕士研究生，研究方向：动物痹碎法制备可溶性抗原。
病及微生物免疫学。通讯作者：李宏胜 蛋(-t含量测定采用Lowry法‘“。分别测定3种菌可溶
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EffectsofUndaria soluble fiberOil
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