博尔纳病毒在宁夏的人和动物感染的检测.pdf

2O10，26 (4) 中 国 人 兽 共 患 病 学 报 ChineseJournalofZoonoses 389 文章编 号 ：1002—2694(2010)04—0389—05 博尔纳病毒在宁夏的人和动物感染的检测 刘 建 ，马 彦 ，张 颖 ，王振海 ，谢 鹏。 摘 要 ：目的 对临床 VE患者 以及其本人接触动物 的检测 ，探讨 BDV在宁夏地 区的感染状况及感染机制 ，并分析 BDV 核酸和转化后 的氨基酸序列 ，构建病毒种系发生的来源。方法 应用巢式逆转录酶聚合酶链反应结合荧光定量 PCR检测 患 者及其接触 的动物的外周血单核细胞 的p24和 p40基 因片段 。对检测阳性标本进行连接测序 ，应用 MEGA和 DnaSP4．0软 件对测序结果 同国外的标准株 HE80、Hl766、strainV等进行核酸和氨基酸序列对 比分析 ，并构建病毒基 因的系统发生树 。 结果 在 6O例 VE患者及其接触 的71O绵羊中，PCR检测发现有 3例 阳性，阳性检 出率 5 ；9头绵羊阳性，阳性检 出率为 1．27 。基 因聚合分析显示人和动物BDV 的核酸序列和编码氨基酸序列与德 国马源性 的HE80株 同源性高达 100 ，重构 基 因系统发生树可见宁夏 VE患者和牛羊 BDV核苷酸序列与 国外的标准株形成宁夏一德 国一日本 的混合支系，同时宁夏绵羊 BDV序列也形成 了一个独立 的支系。结论 宁夏地 区人和牛羊存在 BDV 的 自然感染 ，并且人 的感染存在动物源性 ，其传染 途径很可能是呼吸道 的传播可能引起脑炎的非特异性的临床症状 ，病毒在种系发生 中与德 国马源性 HES0株有极高的同源 性 ，病毒可能由国外引入本土 ，不排除病毒株变异 的可能 ，人和绵羊之 间存在相互传染的可能。 关键词 ：博尔纳病毒；感染 ；巢式逆转录实时荧光定量 PCR 中图分类号 ：R373 文献标识码 ：A DetectionofBornavirusinfection inhumanandanim alin Ningxia LIU Jian，MA Yan，ZHANG Ying，WANG Zhen-hai，XIEPeng (1．DepartmentofNeurology，theAffiliatedHospitalofNingxiaMedicalUniversity，Yinchuan750004： 2．DepartmentD’Neurology，theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China) ABSTRACT：Thepurposeofthisstudywasto investigatetheinfectionofBornadiseasevirus(BDV)inviralencephalitis (VE)patientsand theanimalstheyexposed to，and toprobeBDV infectionmechanismsinNingxiaregion．BDV nucleicacid andtheaminoacidsequenceswereanalyzedaftertransformation，phylogeneticoriginoftheviruswasconstructedaswel1．The P24andP40fragmentsofBDV weredetectedbynestedreversetranscriptasepolymerasechainreaction (RT—PCR)withreal timePCR inperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)from VE patientsandtheexposedanimals．Beforecomparingwith theoverseasstrainsincludingHE80，H1766andstrainV byM EGA andDnaSP4