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溪黄草多糖含量测定与活性研究_药学论文
溪黄草多糖含量测定与活性研究_药学论文
【摘要】 目的研究溪黄草多糖含量及其对羟自由基的清除作用和抑菌作用。方法从溪黄草中提取精制多糖,测定出溪黄草多糖对葡萄糖的换算因子,用蒽酮硫酸法比色测定计算多糖的含量;采用Fenton反应体系为模型,研究多糖对羟自由基的抑制作用;采用滤纸片法研究多糖的体外抑菌作用。结果溪黄草多糖含量为4.18%,重现性、稳定性和回收率较好;活性测试结果表明溪黄草多糖对羟自由基有较好的清除作用,对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌有一定的抑菌效果。结论 溪黄草多糖含量测定方法简单可行,具有一定清除自由基和抑菌活性。
【关键词】 溪黄草;多糖;含量测定;羟自由基;抑菌作用
Abstract:ObjectiveTo study the content of polysaccharide from Rabdosia serra (Maxim.) Hara and its effect on hydroxyl free radical and antibacteriostatic effect. MethodsPolysaccharide was extracted from Rabdosia serra (Maxim.) Hara, and its content was measured by way of anthronesulphuric acid. Its inhibitory effect on hydroxyl free radical was studied by Fenton reaction system as a model. Its antibacteriostatic effect was also studied.ResultsThe research showed that polysaccharide content of Rabdosia serra (Maxim.) Hara reached 4.18%. It had inhibitory effect on hydroxyl free radical, staphylococcus aureus and B. subtili. ConclusionThe method of measuring polysaccharide content is simple and reliable. The polysaccharide has some activities.
Key words:Rabdosia serra (Maxim.) Hara; Polysaccharide; Content determination; Hydroxyl free radical; Anti
溪黄草Rabdosia serra (Maxim.) Hara为唇形科香茶菜属植物,是一种多年生小草本。具有清热袪湿、凉血散淤之功效,民间用于治疗急性肝炎、急性胆囊炎、跌打淤肿等症[1]。多糖是一类免疫活性物质,具有抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老等作用[2~5]。目前对溪黄草多糖的研究未见报道。本文建立石油醚去脂乙醇去杂热水提取氯仿、正丁醇去蛋白质活性炭去色素乙醇沉淀的提取工艺,从溪黄草中提取多糖,测得溪黄草多糖对葡萄糖的换算因子,用蒽酮硫酸比色法测定并计算出溪黄草多糖含量,根据实验条件研究了其对羟自由基的清除作用和体外抑菌作用,期望为肇庆山区中药材的综合开发利用提供一些参考。
1 器材
1.1 仪器DJ倾倒式粉碎机、A2004N和FA2004N电子天平、RE旋转式蒸发器、HH-4型数显恒温水浴锅、低温冰柜、脂肪抽出装置、电热恒温真空干燥箱、752分光光度计、UVProbe型紫外可见光光度计、电热手提压力蒸气消毒器、水式热恒温培养箱。
1.2 材料溪黄草购于肇庆中药材市场;大肠杆菌(Escherichia coil)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Stapphy locacus aureus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、酵母菌(Yeast fungus)均由肇庆学院生物学系微生物室提供。(细菌于牛肉膏蛋白胨培养基上活化(37℃,24 h);霉菌于查氏培养基上活化(28℃,48 h);酵母菌于无菌水中活化(28℃,4 h)。
1.3 试剂蒽酮、浓硫酸、硫脲、水杨酸、过氧化氢、硫酸亚铁、无水乙醇、丙醇、石油醚、乙醚、氯仿、正丁醇等为国产分析纯。
2 方法与结果
2.1 溪黄草多糖的提取与精制称取溪黄草粉末60 g,置脂肪抽出装置中,加入石油醚(60~90℃)250 ml,回流脱脂。滤渣挥干溶剂后,加入80%乙醇回流提
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