灯盏细辛活性部位对神经细胞α3尼古丁受体蛋白水平的影响_药学论文.docVIP

灯盏细辛活性部位对神经细胞α3尼古丁受体蛋白水平的影响_药学论文 灯盏细辛活性部位对神经细胞α3尼古丁受体蛋白水平的影响_药学论文 作者：闫秀明，邓婕，齐晓岚，黄勇，王永林，官志忠 【摘要】 目的研究灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物不同活性部位对神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中尼古丁乙酰胆碱能受体 (Nicotinic acetylcholine receptor, nAChR)蛋白水平的影响及其对抗β-淀粉样蛋白(Aβ) 细胞毒性的作用机制,以探讨其在阿尔茨海默氏病(Alzheimers disease，AD) 治疗中的作用。方法选用一定浓度的灯盏细辛不同部位及Aβ25～35处理SH-SY5Y细胞，用比色法测定培养细胞MTT还原率，蛋白质印迹法测定尼古丁受体α3亚单位蛋白水平。结果灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物不同部位中，经凝胶柱分离的第一区段、该区段经反相硅胶柱分离的低极性部位及乙酸乙酯萃取后再以正丁醇获得的萃取物，经凝胶柱分离的第四区段经反相硅胶柱分离出的低极性部位能上调SH-SY5Y细胞中α3nAChR 蛋白水平;同时能减弱Aβ25～35的细胞毒性作用。结论灯盏细辛醇提取乙酸乙酯萃取物分离部位可能是中药灯盏细辛的重要的活性部位，在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。 【关键词】 灯盏细辛; 神经母细胞瘤细胞; α3尼古丁受体; β-淀粉样蛋白; 阿尔茨海默病 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of the active parts extracted from Herba Erigerontis on the protein level of α3 nicitinic receptor subunit in human neuroblastoma (SH-SY5Y) cells and against the neurotoxicity in SH-SY5Y cells induced by beta-amyloid peptide (A ). MethodsThe SH-SY5Y cells were treated by a certain safe concentration of the active parts extracted from Herba Erigeronitis, and exposed to Aβ25～35. MTT reduction was detected by photomatric assay, and the protein level of α3 nAChR subunit was detected by Western-blotting. ResultsThe active parts extracted from Herba Erigerontis stimulated upregulation of α3 nAChR protein in the cultured cells and prevented the MTT reduction resulted from Aβ. ConclusionThe active parts extracted from Herba Erigerontis may prevent neurotoxicity of Aβ by the upregulation of nAChR, which might play an important role in therapeutic strategy of AD. 　　Key words： Herba Erigerontis; Neuroblastoma cells; α3 nicotinic receptor; β-amyloid peptide; Alzheimer disease 　　阿尔茨海默氏病(Alzheimers disease，简称AD)是一种主要在老年期发生的以智力缓慢性进行性丧失为特征的神经变性疾病，是痴呆病中最常见的类型[1]。AD脑组织中典型的神经病理学改变是由β-淀粉样蛋白(β-myloid protein，Aβ)沉积形成的老年斑和高度磷酸化Tau蛋白聚集构成的神经原纤维缠结 [2]。Aβ在AD的病因学或病程发展中起关键作用,Aβ的神经毒性作用是造成AD神经退行性变的主要机理之一[3，4]。 　　尼古丁乙酰胆碱能受体( nicotinic acetylcholine receptor，nAChR或称尼古丁受体)与学习和记忆等认知功能密切相关, 还调节多种其他受体的功能，并具有对抗神经细胞毒素性的神经保护作用[5]。在较早的一些研究中就发现，AD患者大脑皮层尼古丁受体出现持续和严重的丢失，大脑皮层nAChR缺