灰树花多糖协同化疗药物抗肿瘤作用及其分子机理初探_药学论文.docVIP

灰树花多糖协同化疗药物抗肿瘤作用及其分子机理初探_药学论文 灰树花多糖协同化疗药物抗肿瘤作用及其分子机理初探_药学论文 作者：陆震宇１，蒲 红2，傅荣杰3，韩白衣3Δ 【摘要】 目的 探讨灰树花β多糖在抗肿瘤细胞中的作用和协同化疗药物增加其杀伤肿瘤细胞的作用。另外通过对p53和MDM2的研究，发现了两者协同作用的分子机理。方法 用CCK-8方法测定了灰树花β多糖协同化疗药物处理HCT116后的细胞存活率(cell survival rate，CSR)；用PCR的方法测定了p53、MDM2基因的表达。结果 (1)灰树花β多糖对肿瘤细胞的直接杀伤作用高于灵芝多糖。(2)灰树花β多糖协同化疗药物增强其对肿瘤细胞的杀伤作用。(3)灰树花β多糖协同化疗药物的分子机理和抑制抑癌基因p53的拮抗物MDM2基因的表达相关。结论 灰树花β多糖具有直接杀伤肿瘤作用和化学药物协同抗肿瘤作用。 【关键词】 灰树花；化疗药物；p53；MDM2 【Abstract】 Objective The efficiency of anticancer therapy is limited by drug reistance.Recent studies suggest that a polysaccharide extracted from Grifola frondosa is able to kill cancer cells in vivo and in vitro.However， the molecular basis for the polysaccharide from Grifola frondosa synergistic effects with cytotoxic drugs has to be well defined.Methods HCT116 cell survival rate were monitoued by CCK-8 kit.p53 and MDM2 gene expression were checked by semiquantitative PCR analysis of cellular RNA.Results Here we showed the polysaccharide from Grifola frondosa had more great anti-cancer effect than shell-broken spores of G. lucidum in HCT116 cell.Moreover the polysaccharide from Grifola frodosa was detected synergistic effects with cytotoxic drug (ADM). Conclusion We present the evidence that anti-apoptotic gene MDM2 expression may be involved in augented the polysaccharide from Grifola frondosa induced HCT116 cells sensitivity to ADM-treatment. 【Key words】 grifola frondosa；chemotherapeutic drug；p53；MDM2 灰树花(Grifola frondosa)是一种生长在亚热带至温带的大型药、食兼用珍稀食用菌，又名栗蘑、贝叶多孔菌等，日本称之为“舞茸”。在分类学上属担子菌纲多孔菌科，其口味鲜美、营养丰富，含有众多活性物质，灰树花多糖就是最主要的一类活性成分。灰树花多糖除含有β-1，6-支链β-1，3-葡聚糖外还含有大量高度分支化的β-1，3-支链β-1，6-葡聚糖，研究表明，这种特定的结构使其拥有更强的生物调节活性［６］。作为一种生物反应调节剂(BRM)，灰树花多糖具有增强免疫功能、抑制肿瘤、抗HIV病毒、稳定血压、降低血糖、改善脂肪代谢等广泛的生理活性［１］。 灰树花β多糖具有明显的抗肿瘤作用，能激活机体免疫细胞群如T淋巴细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞，并可促进多种细胞因子的分泌如IL-2、IL-8、IL-12、γ-INF、TNF-α等，增强肿瘤局部免疫反应，抑制肿瘤发生和转移［２～４］。 化疗药物对正常细胞的毒副作用在一定程度上限制了它对恶性肿瘤的治疗作用。 1 材料与方法 1.1 细胞培养 用10%牛血清(PAA Laboratories Gmbh)DMEM(PAA Laboratories Gmbh)培养液在37℃、5%CO2条件下培养人肠癌细胞系HCT116。 1.2