研究党参与首乌等混合注射液上调抗氧化酶的表达作用_医学论文.docVIP

研究党参与首乌等混合注射液上调抗氧化酶的表达作用_医学论文 研究党参与首乌等混合注射液上调抗氧化酶的表达作用_医学论文 【关键词】 党参；,,首乌；,,超氧化物歧化酶；,,谷胱甘肽过氧化物酶；,,丙二醛 　　摘要：目的探讨党参、首乌、天麻、麦冬、白术、续断混合注射液对快速老化大鼠学习记忆及血、肝、肾、海马、脑皮质抗氧化酶SOD，GSHPX和过氧化物MDA的影响。方法采用氟哌啶醇造成大鼠获得性记忆缺失动物模型，通过电跳台回避法和腹腔注射党参、首乌等混合注射液，观察对照组、模型组、实验组大鼠行为学改变，测定各组大鼠血和组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)和脂质过氧化物丙二醛（MDA）的含量。结果与对照组、模型组比较，党参、首乌等混合注射液可维持学习记忆功能，并使多种组织SOD和GSHPX显著升高、MDA显著降低，差别有非常显著性意义(0.001)。结论 党参、首乌等混合注射液有改善学习记忆和上调抗氧化酶SOD、GSHPX、下调过氧化物MDA表达作用，说明党参、首乌等传统中药延缓衰老与促进抗氧化机制、减轻氧自由基损伤有关。 　　关键词：党参； 首乌； 超氧化物歧化酶； 谷胱甘肽过氧化物酶； 丙二醛 　　党参（Radix Codcnopsitis Pilosulas）对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、血液和造血系统都有重要改善作用，是益气补脾的上乘良药［1~3］。首乌Polygonum Multiflorum Thunb.有延年益寿、益聪增智、健脑调心、保肝、促进血细胞新生和发育、降血脂和抗动脉粥样硬化等多方面的作用［4~6］。天麻Gastrodia elata Blume“主诸风痹，久服益气，轻身长年”，近年来对抗衰老和促进学习记忆作用倍受重视，日本将其用于治疗老年性痴呆［7,8］。麦冬养阴润肺、益胃生津、清心除烦、益气润肠，汤剂及注射液对冠心病、心绞痛有一定疗效［9,10］。白术Atractylis macrocephala Koidz.被医家视为延年益寿珍品，在宫庭长寿方中使用频率超过45%以上［11］。续断Dipsacus asperciaes有抗衰老作用，对神经元过度表达有明显抑制作用，并可改善大鼠学习记忆［12］。鉴此，本实验在研究党参、首乌等单味药物的基础上，采用党参、首乌等混合注射液作实验动物腹腔注射，通过对各组动物血和组织SOD，GSHPX，MDA含量测定和各组动物行为学观察，旨在进一步研究党参、首乌等混合注射液对实验动物学习记忆、抗氧化酶、过氧化物是否产生影响，从而探讨党参、首乌等传统中药延缓衰老的作用机理。 　　1 器材与方法 　　1.1 党参、首乌等混合注射液制备党参、首乌、天麻、麦冬、白术、续断由恩施州中药材生产GAP（质量管理规范）示范基地提供，采用水提醇沉法制成含生药30%的混合注射液，瓶装密封消毒备用。 　　1.2 药品及仪器氟哌啶醇注射液（湖南洞庭药业股份有限公司生产）， SOD、GSH-PX和MDA试剂盒（南京建成生物工程研究所生产），电跳台回避反应箱（华中科技大学同济医学院病理生理系提供），GL-20G II型高速低温离心机，UV-2450分光光度仪，水溶箱。 　　1.3 分组雄性 Wistar大鼠30只，鼠龄40~50周，体重300~350 g（华中科技大学同济医学院动物中心提供）。随机分为对照组：生理盐水10 只；模型组：氟哌啶醇10只；实验组：氟哌啶醇+党参、首乌等混合注射液10只。 　　1.4 电跳台行为学训练及测试实验装置为30 cm×30 cm电跳台回避反应箱，箱底为铜栅，可通刺激电流。另有一高5 cm、顶端直径5 cm橡胶圆台即避电击平台，固定置于箱内一角铜栅上，大鼠能在平台上停留。实验开始后，将大鼠放于回避反应箱内，使适应3~5 min，消除探究反应。底部铜栅通电（36V）2 s，大鼠受电刺激后逐渐学会跳上平台回避电击。多数大鼠可再次或多次跳回铜栅上，受电刺激后又重新跳上平台，如此训练3 min。记录每只大鼠受电刺激次数或犯错次数，以此作学习成绩，如此持续3 d，直至每只大鼠犯错次数为0~1次。剔除犯错次数2次以上的大鼠，再据学习成绩均分至各实验组。 　　1.5 给药途径和剂量实验动物在行为学训练及测试结束后，除对照组外，模型组和实验组均按每克体重2次/d腹腔注射0.001 mg氟哌啶醇注射液，持续3 d。实验组在继续注射氟哌啶醇注射液的同时，再按每g体重bid腹腔注射0.003 ml党参、首乌等混合注射液，持续10 d。对照组2次/d等量腹腔注射生理盐水，持续10 d。 　　1.6 组织SOD，GSHPX测定注射实验结束后，再测试行为学改变并记录，随后断颈处死各组动物。迅速取血及各种组织，血液离心保留血清，组织制成10%匀浆。SOD