发酵法生产L-亮氨酸研究.pdfVIP

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i’—F1r一’—:”T-.……-}…” 露≯《≯氨≥j基∥”∥,r…¨,曩I”!登 :f舒需辫 :二:::j:==:::=;:::二,j,.:;::.。。 芝?^i=:支ji二=.::=:::: 发酵法生产L一亮氯酸研究 杜军 陈宁徐庆阳 马跃 天津科技大学生物工程学院 【摘要】随着人口老龄化及保健产业的发展,L一亮氨酸的全球的需求量大幅增加,但其生产方法却 较为落后。本研究从L一亮氨酸生产菌种、生产工艺研究出发,已经选育出一株带有目的遗传标记的L一亮 氨酸高产茵TK0303,并利用IOL发酵罐在优化条件下发酵72h,产L-亮氨酸359A_。 【关键词】L一亮氨酸;代谢流分析;工业化发酵生产 1、前言 氨基酸是构成蛋白质的基本单位,是生物体内 癌、抗病毒、抑制细菌生长等生理活性的。最新研 不可缺少的营养成份。L.亮氨酸是3种支链氨基酸 究表明,由L.亮氨酸合成的多聚物,是临时创伤敷 之一,也是人体8种必需氨基酸之一,在医药、食 料的最佳原料之一,极具发展潜质。随着人口老龄 品、饲料、化妆品等行业中广泛应用。尤其在医疗 化和人们保健意识的增强,全球对其需求也在不断 领域中,L亮氨酸是临床选用的复合氨基酸静脉注 增加。据报道,L亮氨酸的需求量从1997年开始, 射液不可缺少的原料,还可用于诊断和治疗小儿突 就以每年15%一20%的速度快速递增。据估计,到 发性高血糖症和作为头晕治疗及营养滋补类药物。 2010年,世界对亮氨酸的需求量将达100(M)吨以上, 此外,以L亮氨酸为原料合成的L广亮氨酸Sch赶年产值达15亿元以上。 O CHfC一。一 . C00H J ·.H CH上C-H CH3 NH2 图1 L一亮氨酸化学结构式 2、发展现状 发酵法三种。 L亮氨酸的生产主要有水解法、化学合成法及 化学合成法由于其成本高,污染严重;而水解 ·137· 2007年全国发酵行业高峰论坛 法污染也比较严重,且收率低,生产规模难以扩大, 发酵积累L一亮氨酸10-13.59/L。 同时由于水解法采用动物源原料进行生产,因此其 安全性难以得到保障,国外发达国家大多已采取政 获得具有2.噻唑丙氨酸抗性(2-TAr)兼蛋氨酸和 策限制水解法制备亮氨酸。 发酵法是以微生物直接生产L亮氨酸,成本 13%的葡萄糖培养基中可积累L广亮氨酸289/L。证 低、污染小、原料利用率高,是国内外目前主要的 明了该菌株已解除了L广亮氨酸对其生物合成的第 生产形式,并已经形成一定规模的工业生产能力。 一个酶*异丙基苹果酸合成酶的反馈抑制和阻遏。 但目前国内尚未实现利用发酵法工业化生产亮氨 Akaslai等研究了通风等条件对产酸率的影响,在最 酸。 佳条件下该菌株产酸率可达309/L。 3、国内外研究现状 国内研究方面,张素鑫等由钝齿棒杆菌 L.亮氨酸的生产主要以占了世界总产量60%左 右的日本为主。与日本相比较,我国的L广亮氨酸生 产水平还很低下,目前国内虽然已有少数生产厂 家,但菌株产酸水平不高,产量较小,远不能满足 快中子处理后获得变异株L-421(L异亮氨酸缺陷、 国内市场的需求,行业水平亟待

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