猪精液预处理稀释液与冷冻基础液配伍效应研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会论文集 猪精液预处理稀释液与冷冻基础液配伍效应研究 胡建宏’，李青旺·1’2，江中良1，陈晓宇1，韩增胜2，杨海1 (1．西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100；2．燕山大学环境与化学工程学院河北秦皇岛 066004) 摘要：采用6种常温保存液对猪精液进行预处理，再用3种冷冻基础液进行冷冻保存，冷冻一解冻 后以精子活率作为评定指标，研究常温保存液和冷冻基础液对猪精液冷冻保存的效果，以及他们之 间的配伍效应。结果表明，不同的常温保存液对解冻后精子活率的影响存在显著差异(PO．05)，而 3种冷冻基础液对冻后精子活率的影响无明显差异(P0．05)；不同的常温保存液与冷冻基础液之 间存在明显的配伍效应(P0．01)，并且用含甘油的稀释液对平衡不同时间的精液冷冻时，其配伍 效应又有所不同，这可能与常温保存液和冷冻基础液的成分及其互作效应有关；常温保存液和冷冻 基础液2种因素对精子活率的影响，常温保存液占主导地位。 关键词：猪精液；常温保存液；冷冻基础液；精子活率；配伍效应 20世纪50年代，自从科学家PolgeⅢ首次报道用猪冷冻精液人工授精成功获得仔猪后，由于 应用冷冻精液进行人工授精在降低公猪饲养成本，提高母猪繁殖力，扩大优良种猪利用效率等方 面的极大优势，引起了各国科学家的高度关注。近年来，随着人们生活水平的不断提高以及畜牧 业向产业化、规模化、工厂化方向的迅猛发展，尤其在世界各国充分享用优良种猪遗传资源方面， 通过猪冷冻精液进行人工授精显示出良好的发展前景和巨大的生产潜力幢_31。但是，与液态保存 的精液和自然交配相比，由于猪冷冻精液人工授精后母猪较低的妊娠率和较少的产仔数等缺陷， 极大地限制了猪冷冻精液的推广和应用H喵1，与目前应用甚广的牛冷冻精液相比，相差甚远拍3。在 优良种猪的繁殖方面，利用猪冷冻精液进行人工授精仍非常有限，大多数国家或地区应用的仍然 是16～20℃保存的液态精液川。 与牛等其他家畜相比，由于猪精子结构和细胞成分的特殊性，致使猪冷冻精液的品质一直难 以提高，实际生产中无法大面积推广应用。在现今国内外猪冷冻精液的研究报道当中，众多学者 致力于稀释液的筛选、精子冻后结构的变化以及实验室条件下猪精液的冷冻技术研究嵋1¨。在猪 精液冷冻技术的研究方面，国内外学者基本上都是将所采集的精液稀释后进行冷冻，并且大多研 究是分别筛选稀释液和冷冻基础液，而对于利用不同稀释液进行预处理后，稀释液与冷冻基础液 之间的配伍效应未作详细研究，从而在一定程度上影响了猪细管冻精的质量。本研究将用不同稀 释液预处理的精液再用不同冷冻基础液进行交叉配伍冷冻研究，探讨了目前常用的猪精液预处理 稀释液与冷冻基础液之间的配伍效应，以期为猪精液的冷冻保存提供理论和实践依据。 1材料与方法 1．1器械与试剂 1．1．1器械生物冷冻仪(BIOTRONICS (SZ-97型，上海精密实验设备有限公司)等。 檬酸钠、果糖、牛血清白蛋白(Sigma进口分装)；L一甘氨酸(北京鼎国生物中心)；柠檬酸(北京 世纪星化工有限责任公司)；甘油(天津巨星盛源化学试剂有限公司)。 1．2精液采集及品质评定 选取秦皇岛市抚宁县瘦肉型种猪繁育基地的1．5～2岁、体格健壮、膘情中等、性欲旺盛的约克 夏种公猪。利用手握法采集公猪射精中间浓厚段精液。精液采集后，立即在35～38℃下进行常规 【作者简介】胡建宏(1969一)，男，陕西白水人，副教授，博士。主要从事动物生殖生理与调控技术研究。 【通讯简介】李青旺(1956一)，男，陕西米脂人，教授，博士生导师。主要从事动物生殖生理与调控研究。 495 中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会论文集 恒温，I．5h内运回实验室备用。 1．3精液的稀释与平衡 1．3．1精液的第一次稀释与平衡将品质评定合格的精液运回实验室后，首先进行离心(500×毋 10 h。 葡一乳一柠一甘液(A3)等3种稀释液作为冷冻基础液n5-171。I液为冷冻基础液加卵黄后的稀释液，卵 黄的添加量为20％(体积分数)，II液为加入冷冻保护剂一甘油的I液，甘油的最终浓度为3％。 将经过第一次稀释、平衡的精液先进行离心(17℃，800x白1