低氘水对人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖抑制作用的研究.pdfVIP

第二届全国稳定同位素新技术开发与应用交流研讨会 2013·无锡 低氘水对人肝癌细胞SMMC．7721体外增殖抑制作用的研究 李猷·，林轶凡·，樊敏伟2，姚裰2 (1上海化工研究院200062；2国家中药制药工程技术研究中心201203) 的分裂增殖抑制作用。随着培养时间的推移，肝癌细胞在低氘水的培养环境下表现出一定的生长速度放缓趋势。 关键词：低氘水；肝癌细胞；抑制 多功能酶标仪：美国伯藤仪器有限公司； 1前言 J．JP超净工作台：上海净化设备厂； 20世纪90年代早期，匈牙利分子生物学家索 立式圆形压力蒸汽灭菌锅：上海华线医用核子 姆亚博士认为氘的缺失能显著影响细胞分化的过 仪器有限公司 程，而其研究的最重要的结果是：低氘水能显著抑 2．3细胞培养 制肿瘤细胞的分裂繁殖。依照这一科学结论，从 人肝癌细胞SMMC．7721用DMEM培养基培 1990年开始索姆亚博士开始用低氘水对癌症等疾养，培养基中含有10％／J,牛血清，100U／mL的青霉 病患者进行了大量的临床研究，揭示了低氘水抗癌 素和100U／mL的链霉素。所有细胞在培养过程中 效果的分子机理，发现低氘水对癌症的防治和治疗 放置在C02含量为5％的培养箱，在37℃恒温条件 具有辅助作用。 下进行培养。 俄罗斯研究人员的研究也发现，如果把普通水 2．4cck．8法检测肿瘤细胞的增殖活性 中氘的体积分数减少65％，就会表现出一定的抗肿 利用cck．8试剂盒对细胞增殖进行测定。 瘤特性，能抑制肿瘤生长，延长小鼠存活期。本研 SMMC-772 1细胞(5000个／孔)接种96孔培养板中， 究拟采用体外细胞培养观察低氘水对人肝癌细胞 过夜后，各低氘水样品组吸出原培养基，更换为低 增殖的抑制作用。 氘水配制的培养基(25 ppm低氘水、50ppm低氘 水、100 ppm低氘水)，每种培养基设4个复孔，分 2材料与方法 2．1实验材料 测试样品：25 ppm低氘水、50ppm低氘水和 检测，测定各孔的光密度(0D)值。结果取3次实验 100 ppm低氘水为上海化工研究院提供；对照的饮 平均值。以各培养时间的OD值作图，得到个培养 用水采用屈臣氏蒸馏水。所有样品在配置细胞培养 基条件下人肝癌细胞SMMC．772l的生长曲线。 基时均经过高压灭菌锅灭菌处理。 SMMC．772 3实验结果与讨论 l细胞株购自中科院上海生化细胞 所细胞库。DMEM培养基粉和优质胎牛血清均购自 利用各种不同培养基培养细胞一定时间后，利 nm 用cck．8试剂盒测试细胞的增殖情况，利用450 GIBCO公司，cck．8试剂盒为日本同仁化学研究所 产品。 处的吸光度值反映细胞数目的多少，通过比较低氘 水组(25 2．2仪器设