巢式聚合酶链反应技术检测DLBCL中bc12%2fIgH基因重排研究.pdfVIP

总之，淋巴结被膜显著增厚、淋巴滤泡反应性增生、闭塞性血管内膜炎、血管周及副皮质区以浆细 胞为主的混合性炎细胞浸润是梅毒性淋巴结炎相对特征的组织学改变，另外可见上皮样肉芽肿、单核样B 细胞增生及小灶性碎屑样坏死等，在出现这些改变时，病理医生应考虑到梅毒性淋巴结炎的可能，应及 时了解有关病史，并提请临床行梅毒血清学检查，在得到阳性结果后可作出梅毒性淋巴结炎的诊断。病 理诊断梅毒性淋巴结炎必须密切结合临床，同时在日常工作中应拓宽思路，避免漏诊，延误治疗。 巢式聚合酶链反应技术检测DLBCL中 bcl2／IgH基因重排研究 浙江杭州浙江大学医学院病理与法医学研究所(310058) 蔡莺莺赵菁周韧 Bcell 弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large Hodgkin’s 10％．40％可被检测到，并且在生发中心来源的亚型中更常见。 q32．33的免疫球蛋白重链(immunoglobulinheavy cluster 2个区域：主要断裂点决定区(majorbreakpointregion，MBR)和次要断裂点决定区(minorregion， cluster 约500bp。另一个断裂点决定区——中间断裂点决定区(intermediateregion，icr)最近已被识别，它 element，JH)，表 位于MBR与mew之间。在14号染色体上，断裂点主要存在于IgH基因的铰链区(joining 明异常重排过程是这种转位的主因。由于大多数染色体断裂点位于BCL2基因3’端非翻译区内，这使得 Eu增强子的控制下，从而导致BCL2基因在B淋巴细 BCL2编码序列不问断。bcl2／IgH使BCL2基因位于IgH 胞中过表达。BCL2蛋白延长了B细胞的存活期，并通过抑制凋亡导致B细胞的恶性转化。 普遍用于检测恶性淋巴瘤基因重排的方法有核型分析、DNA印迹法(southern blotting)、FISH、 淋巴瘤的转位。然而，它的步骤要求区分细胞获得间期染色体，因此不能应用于福尔马林固定石蜡包埋组 织分析。技术上，核型分析非常麻烦，而且只有25至U30个问期细胞被常规检查和分析。因此它不适合用于 监测微小残留病(minimalresidual 或冰冻组织，在很大程度上在检验科是废止的。PCR检钡llJt(14；18)率显著低于FISH，主要是由于频繁出 分析敏感度的新技术，它比传统的PCR失掉了更多的断裂点。因为为了达到最佳扩增，实时PCR经常要求 是唯一可以用于评估骨髓转移、骨髓清洗和揭示不同身体部位不同时间的2个淋巴瘤关系的技术。 因此，对本研究采集的石蜡包埋组织采用巢式PCR技术、设计三对引物是比较合适的，也可以为临 床诊断和预后判断提供新的方法。 ．129． 1．材料与方法 1．1病例来源 例。所有标本均用4％中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋。阴性对照为确诊的淋巴结反应性增生， 阳性对照为滤泡性淋巴瘤。 DNAFFPE Tissue从固定组织中提取 1．2模板DNA的制备采用QIAGEN公司试剂盒QIAamp la DNA，每例8m厚石蜡组织连续切片6～8片，刮入1．5ml lBufferATL、20u 孵育至乙醇完全蒸发。加入180u