美丽猛水蚤作为对虾白斑综合征病毒传播媒介的研究.pdfVIP

疾病控制的建议：鱼患病后，大多数失去食欲，不吃食，药物难以按要求的剂量进入其 体内。因此对黑鳙棘头虫病的防治，应着重强调以放为主，不要投喂鲜活的饵料，要投喂 适口、不带病原体的饵料，动物性饵料需冷冻后再投喂。 治疗可采用口服甲苯咪唑、敌百虫等药物，在饵料内加入上述药物采用内服的方法有 一定作用。 参考文献(略) 李登来，车育 (烟台大学海洋学院山东烟台) 第三节 美丽猛水蚤作为对虾白斑综合征 病毒传播媒介的研究 从20世纪60年代以来，对虾养殖业在世界范围内得到了快速的发展，然而由于 害所有对虾养殖品种的一种病毒性疾病，可以造成对虾极高的死亡率和重大经济损失 (在养殖条件下在3—10d内就使对虾的死亡率高达100％)。对虾感染WSSV的特点是 在其头胸甲处有0．5—2．0 mm的白斑出现，有时会伴有体色发红的现象。该病毒现已经 归属于白斑病毒属(贶却ovirus)，线头病毒科(Whispoviridae)。 WSSV的宿主范围及其广泛，包括桡足类、对虾、龙虾、淡水螯虾、螃蟹和沼虾，这也是 该病毒得以在世界范围内迅速传播的原因之一。 虽然桡足类作为WSSV宿主进入研究人员的视野已经十年多了，但是直到如今仍然 缺少桡足类作为媒介在WSSV传播中的实验证据。因此，本实验的目的就是检验桡足类 是否可以成为WSSV的传播媒介。 一、材料和方法 (一)实验动物 1．美丽猛水蚤(Nitocra sp．) L 美丽猛水蚤2004年采自青岛胶南的对虾养殖池塘中，然后一直饲养在实验室的20 的水族缸中(20℃，32×10q)，每天投喂一次混合藻液，混合藻液为湛江等鞭金藻和亚心 形扁藻按3：1的比例混合。 Bate，1888) 2．日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicus 日本囊对虾的仔虾和稚虾由山东省荣成对虾育苗场馈赠。日本囊对虾的仔虾 (0．002—0．003g)饲养在实验室内的50L的水缸内(23℃，32×10。9)，每天3次投喂 501 WSSV阴性的卤虫无节幼体。 日本囊对虾稚虾(1．8-2．o)g饲养在300L的水缸内，每天两次投喂对虾商品颗粒 料。实验前，使对虾适应(25±2)℃的实验温度并随即选取对虾检测以确保其为WSSV 阴性。 (二)病毒粗提液的制备 病毒粗提液的制备参照Vidal等的方法进行。采集头胸甲有白斑的感染WSSV的对 虾，将其肌肉组织和头部软组织(400 g)在0．9％NaCI中匀浆，然后4。C条件下6000×g 离心15rain，收集其上清液，再在4。C条件下10 min，将其上清液经 000×g离心20 mL的塑料离心管中，一80。C冷冻以待后用。在冷冻前，病 O．4斗m滤膜过滤后，分装在50 毒粗提液要经过PCR检验是否携带WSSV。 (三)攻毒实验 1．对猛水蚤的WSSV攻毒实验 猛水蚤的WSSV感染实验包括两个处理，每个处理由10个重复组成。每个处理是在 20L的水族箱中放入猛水蚤(密度0。1个·mL。1)。两个处理的水族箱分别放入两个光 照培养箱(20℃，12h光照周期)，以防止交叉感染。 攻毒组中，通过病毒一浮游微藻吸附法对猛水蚤进行WSSV感染实验。湛江等鞭金 500 mL混合O．5 藻(1 mL)和亚心形扁藻(500mL)首先与病毒粗提液300