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延胡索乙素对放射性血管内皮细胞损伤的保护作用研究 俞 静 朴炳奎 花宝金 中国中医研究院广安门医院肿瘤科 北京100043 摘要 目的 探讨延胡索乙素对放射治疗所致内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法 以延胡 索乙素预先处理人血管内皮细胞株EA.hy926，之后，预处理后的部分细胞接受12Gyγ射线照射， 建立放射性细胞损伤模型。分别通过光镜及电镜观察细胞形态及超微结构改变，流式细胞仪检测 细胞凋亡率。检测细胞照射前后乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)的含量变化，荧光素探针 DCFH-DA负载细胞， 流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)生成；WesternBlotting法检测细胞 色素C蛋白表达;酶标仪检测Caspase-3的活性变化。结果 细胞经照射后，细胞形态及超微结 构改变均显示典型的凋亡改变，而延胡索乙素预处理组的细胞凋亡改变明显轻于其它实验组。单 纯照射组血管内皮细胞脂质氧化损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)明显升高，而低 中高剂量的延胡索乙素+R处理组的细胞LDH、MDA则明显降低，组间比较差异显著(P＜0.01)。 THP+R组细胞内的ROS含量及Caspase-3的活性，细胞色素C蛋白表达均显著低于单纯照射组 (P＜0.05)。结论 延胡索乙素可能通过抑制放射诱导ROS生成，抑制细胞色素C蛋白、Caspase-3 激酶凋亡级联反应，抑制细胞内脂质氧化损伤等作用，防治放射所致的内皮细胞激活及损伤，这 可能为预防或减轻放射治疗所致的肺损伤提供一些新思路。 关键词 放射治疗；血管内皮细胞；延胡索乙素；损伤 奢10％FBS的1640蛏 茳行实验。1.2.2实验 照射：分为PBS组、( 童，然后分别加入PBS 孝哥昭射！分蜘PR,q4 胞按试剂盒要求葫 电泳，转膜采用I ：抗体为1：100(C ：物酶(HRP)标记的 ：规则形、体积！ l凋亡特征；线； 核亦呈锯齿状 变化 后，被酯酶水角 咆仪检测DCF 向ROS活性较 交低，且随着’ ,IDA检测结果 舌，与未经任何 对组相比，LDH 司LDH活件及● 达变化 EA.hy926细胞自 j细胞色素C表i 这与流式细胞t 及、巳峨刑肥寺欠， 佥中，我们发现延古 j细胞内经放射诱 羟细胞的氧化损{9 勺细胞凋亡过程中i 乏生的事件，它发！ 温阳化浊通络方对系统性硬皮病成纤维细胞周期和增殖的影响 卞 华 中国中医科学院 北京100700 摘要 目的 运用血清药理学方法，探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤 维细胞周期和增殖的影响。方法 通过SSc患者制备强的松、青霉胺及温阳化浊通络方含药血清， 分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养48小时后，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞 仪分别测定细胞增值和细胞周期。结果 与对照组相比，不同浓度的西医组、中医组、中西医结 合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮损成纤维细胞的增殖(P＜0.05或P＜0.01)。与西医 组相比，20％中西医结合组血清抑制作用更加明显(P＜0.01)。不同浓度的中医组血清能显著提