去B链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究.pdfVIP

第 15 卷第 3 期 中国生物化学与分子生物学报 V o l. 15,N o. 3 1999 年 6 月 Ch inese Jou rnal of B iochem istry and M o lecu lar B io logy Jun. , 1999 去 B 链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究 陈来同　扬志茹　胡美浩 (北京大学蛋白质工程国家重点实验室, 北京　100871) 摘要　在大肠杆菌温度诱导体系中以非融合方式进行去B 链羧端七肽人胰岛素原基因的表达, 获 得去B 链羧端七肽人胰岛素原, 表达产物 占细胞总蛋白量的 13% , 表达产物经 Sephadex G50 柱 层析分离及胰蛋白酶和羧肽酶B 的酶促转化等步骤, 可得到纯度达 94% 以上的去B 链羧端七肽人 胰岛素, 其氨基酸组成与预期值相符, 受体活性是标准猪胰岛素的 1%. 关键词　去B 链羧端七肽人胰岛素, 受体相互作用 - Pur if ica tion and Character iza tion of D es heptapeptide - ( 24- 30) of C term ina l B Human In sulin CH EN L aitong , YAN G Zh iru , HU M aihao ( , , 100871) N ational L aboratory of P rotein E ng ineering P ek ing U niversity B eij ing 　 ( 2430) Abstract D es hep tapep tide of C term inal B H um an p ro in su lin gene w as recom b inated to the exp ression vecto r pBV 220 and exp ressed in E. coli, induced by tem peratu re. T he exp ression 13% . , level accoun ted fo r of to tal bacterial p ro tein s A fter denatu ration and renatu ration the ex 50 p ression p roduct w as pu rified by Sephadex G gel filtration and converted to D es hep tapep tide ( 2430) . of C term inal B hum an in su lin