绞股蓝总皂甙灭螺活性的研究.pdfVIP

绞股蓝总皂甙灭螺活性研究 湖北课题组 摘要：采用从绞股蓝中提取到的总皂甙按不同浓度(30、60、120、240、480rag／L)配制成溶液对钉螺进 行处理，然后用￡I描电镜观察了绞股蓝总皂甙溶液对钉螺头足部的损伤情况。结果显示：绞股蓝总皂甙对 钉螺具有一定的毒杀作用，当用同一类型绞股蓝总皂甙溶液处理时，钉螺死亡率随溶液浓度的增加丽升高， 随着浸泡时间的延长，钉螺的死亡率也升高：绛溶液(LC50)处理的钉螺头肿胀。U唇溃烂变形，足肌肿胀， 表面有许多孔洞。 关键词：绞股蓝总皂甙；钉螺；毒杀作用；电镜}：l描 血吸虫病广泛流行于亚洲、欧洲和北美洲的热带和亚热带地区，它严重危害人们的健康， 而钉螺(Oncomelania Katsurade) hupensis 唯一的中间寄主，因此消灭钉螺是控制血吸虫病的重要措施。目前，利用生活植物灭螺已成 为灭螺研究的热点B-3】，并有实验证明植物的皂甙类成分是一种重要的灭螺有效成分。有人 做过绞股篮水提液的浸杀灭螺实验，其结果表明绞股蓝对钉螺具有一定的毒杀作用[41，经分 Makino)为葫芦科绞股蓝属植物，多年生攀援草本，名七叶胆、甘茶蔓，具有消炎解毒、 止咳祛痰的作用，主要化学成分是绞股蓝皂甙，此外还含有芦丁、商陆素等黄酮类成分【51。 本实验从绞股蓝的叶和茎中提取、分离、纯化，从而得到灭螺活性物质绞股蓝总皂甙，就其 灭螺效果进行了研究。 1材料和方法 1．1实验材料实验用钉螺采自洞庭湖区，转入22C温室于无氯清水中饲养，实验时选用 大小一致且能正常活动的阴性成螺作为实验材料。 1．2实验方法 1．2．1植物材料的处理将采剑的绞股蓝去根洗净，80C下杀青，烘干后剪成碎块，按绞 股蓝总 皂甙的提取分离方浩[6】，用70％乙醇同流提取3次后合并提取液，减压回收乙醇，接着用 乙醚处 理浓缩滤液，弃醚层；再加水饱和正丁醇萃取至止丁醇层显微黄色，然后将正IJ．醇萃取液进 行减 压回收，得残渣；加少量95％乙醇溶液，继而加入10倍量丙酮，过滤得黄褐色粉末即是绞 股蓝 总皂甙。 1．2．2灭螺活性的测定将绞股蓝总皂甙按30、60、120、240、480mg／L五个浓度配制成 溶液，取大小相当的活螺每20只装入一个尼龙网袋，保持良好透气性，每4袋为一组，投 196 入盛有不同浓度绞股蓝总皂甙溶液的塑料桶中，另设清水对照，分别处理24、48、72、96h 后，将处理液中钉螺随机取出l袋用无氯清水冲洗后，放入盛有清水的培养皿中静置24h 作存活检查，实验重复3次，取平均值作为实验结果。 1．2．3上爬试验按上述方法配制的5个浓度梯度的溶液各取500ral，分别盛于500ral的三 角沉淀杯中(水深度约为17era)，同时设无氯水对照。各放入钉螺30只，观察并记录各沉淀 钉螺)。 1．2．4扫描电镜样品制备按LC50配制成绞股蓝总皂甙溶液处理钉螺分别24和48h后取 出，清水漂洗3次，小心碎去外壳，解剖镜-卜．剥离头足，2．5％戊二醛整体吲定，0．1mol／L 磷酸缓冲液漂洗3次。Os04(1％)固定，缓冲液再洗3次，梯度酒精脱水，干燥，喷金，日立 S．570型电镜扫描观察，清水样品对照。 2结果与分析 2．1绞股蓝总皂甙灭螺活性结果分析 绞股蓝总皂甙灭螺效果见表I，可以看出用不同浓度的绞股蓝总皂甙水溶液处理钉螺， 随着浓度的增加，钉螺死亡率呈上升趋势，低浓度效果较差，高于120mg／L的溶液灭螺效 果较好，利用spss软件对处理72h后的实验数据进行概率单位同归分析，其同归方程为 Y=2．21D一4．44(式中D为对数剂量，Y为使用该剂量处理钉螺72h后的夕匕亡率的估计值)， 量浓度为：LC50=101．8mg几。 表1绞股蓝总皂甙灭螺效果统计 ———]丽蘅覆夏—————————————————1n彩匝，m) (1ng／L) 24h 48h 72h 96h 30 0 O 10 30 60 0 0 35 66．7 120 10 40