C-末端残基Arg缺失的D-海因酶的分子形式与稳定性.pdfVIP

卷 期 ! 微 生 物 学 报 !（）： %$%! %$%’ 年 月 日 #$$ %# ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! ()*)+,)- #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 末端残基 缺失的 海因酶的分子形式与稳定性 ! #$% 钮利喜，张学尧，石亚伟，袁静明 （山西大学生物技术研究所 教育部化学生物学与分子工程重点实验室 太原 $.$$$ ） 摘 要：报道 海因酶分子 末端 残基的缺失，导致酶的解聚与稳定性的显著改变。用基因克隆、表达与纯化 (0 @0 A-B 的方法，制备了重组 海因酶（ ）及其 末端残基 缺失的 海因酶（ ）。 和 分析 (0 C!’= @0 A-B (0 C!’ D(D0CAE/ F1G2H)0CAE/ 表明，在完全相同的条件下，两者单体的分子量相同；但天然C!’= 为二聚体，而C!’ 为单体并保持约!$ I 催化底物 海因的活性。突变酶 的 值稳定性显著增加，抗 能力亦有所提高，但热稳定性明显降低。结果预示： C!’ JK D(D (0 海因酶的 末端残基 显著影响酶的分子形式及热稳定性，虽也影响酶活性，但非酶活性所必需。 @0 A-B 关键词：重组 海因酶；突变酶；分子形式；稳定性 (0 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） L%! A $$$%0#$= #$$ $0%$%!0$! 品；内切酶、 连接酶、 聚合酶、 为大连 微生物海因酶（ ， ）是酰胺水解酶超家族 N! (FA 34 (FA FNC K517GM2719) K(N 中的一个成员。根据催化底物的立体专一性，可分为 、 、 N1Q1Z1 公司产品；引物由奥科生物技术有限责任公司代为 (0 O0 ［］ % 合成；质粒抽提、 胶回收试剂盒为博大泰克生物基因技 种类型 。其中 海因酶在工业应用上有鲜明的实 (FA (O0 . (0 际意义。该酶催化底物海因及其衍生物转化成相应的F0氨 术公司产品。其它试剂为国产分析纯。R[ 公司CN@0#$$ 型 基因扩增仪， 公司蛋白纯