共存于厌氧真菌分离培养液中瘤胃甲烷菌的检测及其多样性分析.pdfVIP

卷 期 ! 微 生 物 学 报 !（）： ’( ) * 年 月 日 #$$ %# ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! +,-,./,0 #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 共存于厌氧真菌分离培养液中瘤胃甲烷菌的检测及其多样性分析 % % % # % 成艳芬 ，毛胜勇 ，裴彩霞 ，刘建新 ，朱伟云 % （南京农业大学消化道微生物研究室 南京 #%$$(1 ） # （浙江大学动物科学学院 杭州 *%$$#( ） 摘 要：对分离自山羊瘤胃的真菌分离培养液中甲烷菌进行 扩增、 分析、 及测序分析，研究共 %M 0+N3 +OO4 6;PQ 存于真菌分离培养液中甲烷菌的种类及其多样性。 结果显示：从厌氧真菌分离至第 代，甲烷菌多样性指 +OO4 !1 数由 降至 ，相似性最低为 ；第 代至 代，多样性指数由 升至 ，相似性最低为 。 %R*# $ R(( *! R’ S !1 # $ R(( %R %1 ( R# S 多态性分析 个克隆共得到 个操作分类单元，选择其中 个具有代表性的序列进行测序。序列及系统进 6;PQ ( 1 化分析表明，属于其中* 个操作分类单元的克隆最相似菌都是TD-A9HA0,U 0-@,9 VC./GDH Q3#$#，相似性均为(1 S ， 没有与这些克隆相似性较高的已培养甲烷菌；属于另外# 个操作分类单元的克隆最相似菌都是TD-A9HA0,U 0A.,D .,H@DGL,D (1，相似性均为(’ S ，最相似已知菌为 !#$%’()*+(%,#) VW I N8’ ，相似性为(’ S 。结果表明，真菌培养 液中存在目前尚未分离培养的瘤胃甲烷菌。 关键词：厌氧真菌；甲烷菌； ； +OO4 6;PQ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） X(* 3 $$$%:#$( #$$ $:$’(:$1 反刍动物瘤胃内栖息着各种微生物，包括瘤胃 种分离培养方法获得瘤胃厌氧真菌和产甲烷菌菌群 细菌、原虫、厌氧真菌和甲烷菌。这些微生物互相作 混合物，并利用 、 、 等方法，对真菌培 QZ6 +OO4 6;PQ 用、互相影响，在瘤胃内形成一个复杂的降解饲料、 养液中的甲烷菌进行了检测及分析，研究与瘤胃厌 给宿主动物提供挥发性脂肪酸和微生物蛋白的生物